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磷酸酶PHLPP文献资料
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胰岛素样生长因子-1对血管平滑肌细胞磷酸酶PHLPP蛋白表达的影响
目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及氧化低密度脂蛋白(oxLDL)促血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的细胞内信号转导机制.方法:体外培养的免血管平滑肌细胞分3组处理,以细胞计数、噻唑盐比色法测定细胞增殖能力,Westem Blot定量磷酸酶PHLPP蛋白表达水平.结果:IGF-1(100 μg/L)使VSMC计数及MTF比色A值分别增至对照组的3.02倍及3.06倍.oxLDL(50 μg/mL)使上述两值分别增至对照组的2.03倍及2.91倍.两者均可以显著抑制PHLPP蛋白表达水平.结论:IGF-1及oxLDL的促VSMC增殖作用可能与抑制PHLPP蛋白的负性调节细胞生长作用有关.
关键词： 肌细胞 平滑肌 磷酸酶PHLPP 胰岛素样生长因子-1 氧化低密度脂蛋白 -
C/EBPα和C/EBPβ抑制PHLPP的表达影响细胞增殖
目的 分析影响抑癌基因磷酸酶PHLPP表达的因素,进一步研究肿瘤发生、发展的机制.方法 分析比对多种种属的PHLPP基因序列,根据其启动子中均有碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper,bZIP)转录因子C/EBPα、C/EBPβ的结合位点,也有SP1的结合位点这一特点,通过双荧光素酶报告法和染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP),过表达或抑制C/EBPa、C/EBPβ的表达,再通过PCR、RT-PCR、Western blot、细胞生长实验和肿瘤组织切片免疫组化进行分析.结果 C/EBPα和C/EBPβ与PHLPP的启动子相结合并抑制其表达,与PHLPP的表达呈负相关,SP1不影响PHLPP的表达.结论 C/EBPα和C/EBPβ通过作用于PHLPP影响细胞增殖.
