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冻存外周血文献资料
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碘化钾法抽提冻存外周血DNA的方法初探
目的:探讨碘化钾法从冻存外周血中抽提基因组DNA的产量及质量.方法:对400μL冻存血标本(-20℃保存半年)及200 μL新鲜血标本(4℃保存不超过1周)分别采用KI法提取基因组DNA,比较其浓度和纯度.并进行CYP2C19相关基因的PCR扩增.结果:通过增加处理标本量,可以相应提高从冻存外周血中提取的基因组DNA产量,但获取的DNA纯度低于新鲜血标本.结论:KI法提取DNA时,需要根据实验目的和要求,选择适当的保存方法.
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快速提取冻存外周血中线粒体DNA及其纯化的方法学研究
目的 探讨并建立从少量冻存外周血中快速、简便提取高纯度线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)的技术途径.方法 冻存外周血复温后,经破碎红细胞,裂解白细胞,去除细胞膜和核DNA(nuclear DNA, nDNA)后获得mtDNA;再去除蛋白和RNA,利用紫外光谱分析及凝胶电泳鉴定,获得高纯度mtDNA.结果 能获得无蛋白质及nDNA污染,纯度较高的mtDNA样品.结论 该方法能快速、可靠地从外周血中提取较高纯度的mtDNA,满足常规分子生物学、遗传学和生物信息学等研究领域需要,具有一定的方法学意义.
