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GFAP和MAP2 mRNA在缺血预处理与单纯缺血大鼠脊髓中的表达差异
目的 探讨GFAP、MAP2mRNA在缺血预处理与单纯缺血的大鼠脊髓中的表达差异.方法 将54只200 9雌雄各半的SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(VR组)和缺血预处理组(IPC组)3组.采用肾下腹主动脉阻断法,建立脊髓缺血再灌注模型;Sham组6只,手术开始步骤同其他两组,但不做肾下腹主动脉阻断即缝合伤口;VR组24只,直视下采用动脉夹夹闭腹主动脉段左肾动脉分支起始处下方5 mm处(即肾动脉下型),仅阻断腹主动脉60 min后开放灌注;而IPC组24只,先阻断腹主动脉5 min,开放5 min,随即阻断腹主动脉60 min后开放灌注.再灌注后1、2、5、10 d时对其各个时间点进行后肢神经行为学评分,同时利用实时定量PCR技术检测预处理对大鼠缺血再灌注后脊髓GFAP、MAP2 mRNA表达的影响,用2 ΔΔCt的方法计算各组脊髓中GFAP、MAP2mRNA的表达倍数.结果 54只大鼠术后全部存活.行为学评分发现与Sham术组比较,各实验组行为学评分均下降,随着再灌注观察时间的延长,各组分值均升高,第5天时评分与Sham组差异无统计学意义.实时定量PCR检测GFAP、MAP2 mRNA的表达时发现,I/R组再灌注第2天时MAP2表达显著高于Sham组;IPC组在再灌注1、2d时MAP2表达高于Sham组,且与同时间点I/R组比较差异有统计学意义;IPC组的MAP2 mRNA表达峰值出现的时间较I/R组早,峰值较I/R组高.I/R组仅在再灌注第10天时GFAP mRNA表达高于Sham组,达到峰值;IPC组在再灌注2、5d时GFAP表达高于Sham组,且第5天时达到峰值;L/R组和IPC组各自不同时间点出现的GFAP mRNA的峰值不存在明显差异.结论 GFAP、MAP2mRNA在不同处理大鼠脊髓中的差异表达,可能与急性缺血再灌注后神经组织可逆性的损伤修复的规律有关.
关键词： 缺血再灌注 缺血预处理 胶质纤维酸性蛋白 微管相关蛋白-2基因 实时定量PCR
