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滋肾育胎丸对促排卵小鼠不同着床期子宫内膜HOXA10及下游基因EMX2表达的调控作用
[目的]探讨滋肾育胎丸对促排卵小鼠不同着床期子宫内膜同源框异型基因A10(HOXA10)及下游基因空通气孔同源框2(EMX2)表达的调控机制.[方法]将75只雌性动情间期昆明小鼠随机分为5组,即正常组、 模型1组、 模型2组、 治疗1组、 治疗2组,每组15只.模型1组给予促排卵短方案;模型2组给予促排卵长方案.治疗1组在模型1组方案基础上给予滋肾育胎丸(剂量为0.4 g/mL)治疗;治疗2组在模型2组方案基础上给予滋肾育胎丸(剂量为0.4 g/mL)治疗.正常组给予等剂量生理盐水灌胃和腹腔注射.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、 免疫蛋白印迹(Western blot)法分别检测各组小鼠子宫HOXA10及EMX2 mRNA和蛋白的表达.[结果]与正常组比较,模型1组和模型2组HOXA10 mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.01),EMX2 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.01).分别与对应的模型1组和模型2组比较,治疗1组和治疗2组HOXA10 mRNA和蛋白水平表达均显著上调(P<0.01),EMX2 mRNA和蛋白水平表达均显著下降(P<0.01).[结论]滋肾育胎丸可能通过上调HOXA10表达及抑制其下游基因EMX2的表达来改善小鼠子宫内膜容受性.
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滋肾育胎丸对肾虚-薄型大鼠内膜容受性因子整合素β3及EMX2表达的影响
目的:探讨滋肾育胎丸对薄型大鼠胚胎着床期子宫内膜容受性的影响.方法:将42只雌性SD大鼠随机分为6组,分别为大鼠空白组,肾虚-薄型子宫内膜大鼠空白组,肾虚-薄型子宫内膜大鼠阿斯匹林组,肾虚-薄型子宫内膜大鼠雌激素组,肾虚-薄型子宫内膜大鼠滋肾育胎丸低、高剂量组.药物干预后,利用qRT-PCR法检测小鼠子宫内膜中整合素β3及EMX2表达的表达.结果:造模组的ITGβ3基因的相对表达量较对照组、阿司匹林组、雌激素组、滋肾育胎丸高剂量组、低剂量组低(P＜0.05);滋肾育胎丸高剂量组的ITGβ3基因的相对表达量较其余各组高(P＜0.05),具有统计学差异.造模组的EMX2基因相对表达量较其余各组明显增高,P＜0.05,具有统计学差异;滋肾育胎丸高剂量组的EMX2基因相对表达量比其余各组的表达低,P＜0.05,具有统计学差异.结论:滋肾育胎丸可能通过上调整合素β3及下调EMX2的表达,改善子宫内膜的容受性.
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Emx2和Emx2OS在小鼠胚胎生殖嵴中的表达
目的:探讨转录因子Emx2和Emx2反义非编码长链RNA(EMX2 opposite strand/antisense RNA,Emx2OS)在小鼠生殖嵴发育过程中的表达模式以及对原始生殖细胞发育的作用.方法:分别收集孕11.5～14.5 d小鼠的生殖嵴,通过原位杂交、qRT-PCR和免疫荧光方法,观察分析Emx2和Emx2OS在生殖嵴中的表达定位及其表达水平的变化.结果:在孕11.5～14.5 d雌性和雄性小鼠胚胎生殖嵴中均检测到Emx2OS的表达,而且其表达模式与Emx2高度一致;在小鼠胚胎原始生殖细胞减数分裂的启动以及性别决定的时间点(孕12.5 d),雌性胎小鼠生殖嵴中Emx2和Emx2OS的表达量都显著上调(P＜0.001).结论:Emx2和Emx2OS在胎小鼠生殖嵴中呈同步表达模式,并可能参与调控原始生殖细胞减数分裂的启动.
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GMA诱导16HBE恶性转化细胞中LncRNAEMX2OS的表达及意义
目的:探讨LncRNA EMX2OS在甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱导的16HBE恶性转化细胞中的表达变化及意义.方法:取GMA诱导的第30代16HBE恶性转化细胞及DMSO对照组细胞,采用高通量LncRNA芯片比较两组样本表达谱的差异,并用生物信息学方法筛选出LncRNA EMX2OS及其靶向基因EMX2,采用实时荧光定量PCR(qPCR)分析16HBE恶性转化细胞中LncRNA EMX2OS和EMX2mRNA的表达水平,并与对照组细胞比较.结果:LncRNA芯片结果显示,与DMSO对照组细胞相比,GMA诱导的16HBE恶性转化细胞中LncRNA EMX2OS上调6.01倍;qPCR结果显示,相对于对照细胞,16HBE恶性转化细胞中LncRNA EMX2OS表达上调3.37倍,EMX2mRNA上调1.88倍(P＜0.05).EMX2mRNA和LncRNA EMX2OS表达的变化趋势一致.结论:GMA可以诱导16HBE细胞LncRNA EMX2OS表达上调,LncRNA EMX2OS可作为GMA诱导的16HBE恶性转化细胞中相关特异分子标志之一.
