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亚溶量补体文献资料
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雷帕霉素通过激活自噬减轻亚溶量补体诱导的足细胞黏附损伤
目的 观察雷帕霉素对亚溶量补体C5b-9(sublytic C5b-9,sC5b-9)所致足细胞黏附损伤的影响,并探讨细胞自噬在其中的作用.方法 建立sC5b-9攻击足细胞体外模型,采用透射电镜观察足细胞自噬泡形成,罗丹明标记鬼笔环肽(rhodamine phalloidin)染色后激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架蛋白F-actin的分布及细胞形态,细胞黏附实验评价足细胞黏附能力,Western印迹检测微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein l light chain 3,LC3)Ⅰ型(LC3-Ⅰ)和Ⅱ型(LC3-Ⅱ)的表达,流式细胞术检测整联蛋白α3的表达.结果 (1)成功建立sC5b-9攻击足细胞体外模型,将细胞溶破率≤5％定义为亚溶量攻击;(2)透射电镜和自噬标志LC3-Ⅱ的检测均显示造模后48 h足细胞的自噬水平明显增强;(3)3-甲基腺嘌呤抑制自噬可明显加剧sC5b-9所致的足细胞黏附能力下降及细胞骨架病变,但对整联蛋白α3的表达无明显影响;(4)雷帕霉素干预可显著改善sC5b-9所致的足细胞黏附能力受损及细胞骨架破坏;(5)雷帕霉素明显增强sC5b-9所诱导的足细胞自噬.结论 雷帕霉素可通过增强自噬的途径直接改善亚溶量补体所诱导的足细胞黏附损伤.
