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自然流产绒毛组织中长链非编码RNA H19及ZEB1的表达
目的:探讨长链非编码RNA H19(long non-coding RNA H19,H19 lncRNA)及E盒锌指结合蛋白1(zinc finger E-box-binding protein 1,ZEB1)在自然流产患者绒毛组织中的表达及意义.方法:采用反转录荧光定量PCR(reversetranscriptional quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术及Western印迹分别检测20例自然流产患者(自然流产组)和20例正常早孕行人工流产妇女(对照组)绒毛组织中H 19 lncRNA,miR-200及ZEB1的表达.结果:与对照组相比,自然流产组绒毛组织中H19 lncRNA的表达具有下降趋势,但差异无统计学意义(1.28±0.08 vs 1.66±0.21,P=0.091);miR-200在两组中表达差异无统计学意义(0.75±0.35 vs 0.58±0.33,P=0.129);自然流产组绒毛组织中ZEB1的表达量明显低于对照组,差异具有统计学意义(0.22±0.03 vs 0.41±0.04,P=0.0003).H19 lncRNA与ZEB1表达水平呈中度正相关(r=0.529,P=0.0005),H19 lncRNA与miR-200(r=0.0293,P=0.858)及miR-200与ZEB1(r=-0.132,P=0.416)无明显相关性.结论:自然流产胚胎绒毛组织中ZEB1的表达下调可能与自然流产相关,H19 lncRNA可能参与调控ZEB1的表达.
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miR-429对食管鳞癌细胞EC9706的影响及其分子机制探讨
目的:探讨miR-429对食管鳞癌细胞的影响及其靶向潜在的分子机制.方法:将miR-429 mim-ics、miR-429 mimics NC、miR-429 inhibitor和miR-429 inhibitor NC分别转染至食管鳞癌细胞EC9706,分别设为miR-429 mimics组、miR-429 mimics NC组、miR-429 inhibitor组和miR-429 inhibitor NC组.利用实时荧光定量检测各组miR-429的表达情况,MTT法检测细胞增殖率,通过TargerScans Human7.1预测miR-429靶基因并利用荧光素酶活性检测对其进行验证,蛋白免疫印迹检测各组细胞中E盒锌指结合蛋白1(ZEB1)蛋白的表达情况.结果:空白对照组、miR-429 mimics NC组、miR-429 inhibitor NC组之间miR-429相对表达量差异不明显(P＞0.05).与miR-429 mimics NC组相比,miR-429 mimics组食管鳞癌EC9706细胞中miR-429表达量显著上调(P＜0.05);与miR-429 inhibitor NC组相比,miR-429 inhibitor组食管鳞癌EC9706细胞中miR-429表达量显著下调(P＜0.05).与miR-429 mimics NC组相比,miR-429mimics组中EC9706细胞增殖率显著下降(P＜0.05),miR-429 inhibitor NC组中EC9706细胞增殖率无显著差异(P＞0.05),miR-429 inhibitor组中EC9706细胞增殖率显著增加(P＜0.05).预测miR-429靶基因为ZEB1,荧光素酶活性检测证实ZEB1为miR-429靶基因.与miR-429 mimics NC组相比,miR-429 mimics组EC9706细胞中ZEB1蛋白表达量显著下调(P＜0.05),miR-429 inhibitor NC组EC9706细胞中ZEB1蛋白表达量无显著差异(P＞0.05),miR-429 inhibitor组EC9706细胞中ZEB1蛋白表达量显著上调(P＜0.05).结论:miR-429可通过靶向ZEB1抑制食管鳞癌细胞增殖.
