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低频电针对选择性神经损伤大鼠神经痛维持期脊髓背角PKA-TRPV1通路及痛敏递质的干预作用
目的 探讨低频电针干预神经病理痛维持期脊髓背角(SCDH)蛋白激酶A(PKA)、辣椒素受体(TRPV1)通路的调控机制.方法 将大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型对照组、电针干预组4组.采用坐骨神经分支选择性神经损伤(SNI)方法建立神经病理痛模型.电针干预取术侧足三里、昆仑穴,频率2 Hz,每日1次,连续干预14d.检测大鼠术侧后足缩足阈值(PWT)、SCDH PKA和TRPV1以及降钙素基因相关肽(CGRP)和P物质(SP)水平.结果 SNI模型大鼠术侧PWT下降(P＜0.01),术侧SCDH PKA、TRPV1、CGRP、SP水平均上调(P＜0.05);2 Hz电针可提高SNI模型大鼠PWT(P＜0.01),降低术侧SCDH PKA、TRPV1、CGRP、SP水平(P＜0.05).结论 低频电针能改善神经病理痛,可能与其下调SCDH PKA-TRPV1通路以及CGRP、SP痛敏递质水平有关.
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碱性成纤维细胞生长因子在大鼠坐骨神经分支选择性损伤后的动态变化
目的 观察坐骨神经分支选择性损伤(SNI)大鼠机械刺激缩足反射阈值(PWMT)与脊髓碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-6表达变化的时程关系,探讨神经病理性疼痛中脊髓FGF-2的动态变化规律及致痛机制.方法 雄性SD大鼠100只,采用随机数字表法,将其随机分2组(n=50):假手术组(Sh组)和手术组(SNI组).于术前1d,术后1、4、7、14、28 d观察疼痛行为学,检测机械刺激缩足反射阈值(PWMT),并于术后各时间点应用免疫组织化学、Western blot以及ELISA方法,检测脊髓FGF-2、TNF-α和IL-6含量.结果 SNI后1 d PWMT下降,7d达低,28 d仍处于较低水平,与Sh组术后各时间点和术前比较差异显著(P＜0.05).SNI组脊髓FGF-2含量于术后4d开始增加,14d达高峰,28d仍维持较高水平,与Sh组术后各时间点比较差异显著(P＜0.05).SNI组术后各时间点TNF-α和IL-6的表达高于Sh组(P＜0.05).结论 大鼠SNI模型成功模拟神经病理性疼痛的发生,并且诱发损伤侧脊髓FGF-2以及炎性因子表达增加.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 坐骨神经分支选择性损伤 神经病理性疼痛 炎性因子 脊髓 -
糖皮质激素受体激动剂地塞米松对大鼠血清促炎因子IL-6、TNF-α表达及神经病理性疼痛的影响
目的:探索坐骨神经分支选择性损伤诱导的早期神经病理性疼痛(SNI)模型中给予糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)激动剂对痛行为及促炎因子IL-6、TNF-α分泌的影响.方法:成年雄性SD大鼠随机均分为四组:Sham+Vehicle(生理盐水组),SNI+ Vehicle组,SNI+ DEX(GR激动剂地塞米松)组,SNI+ RU(GR抑制剂米非司酮)组.Von Frey纤维丝检测各组大鼠缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)的变化;WesternBlot和免疫荧光染色检测各组脊髓中GR的表达水平;Elisa检测血清IL-6和TNF-α表达变化.结果:与SNI+Vehicle组比较,SNI+ DEX组大鼠PWT阈值和脊髓GR的表达增高(P＜0.05),血清IL-6和TNF-α浓度降低(P＜0.05);SNI+ RU组大鼠PWT阈值和脊髓GR表达降低(P＜0.05),血清IL-6和TNF-βα浓度升高(P＜0.05).结论:GR在脊髓水平能够通过下调促炎因子IL-6和TNF-α的表达缓解SNI诱导的早期神经病理性疼痛.
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5-HT1受体亚型mRNAs在坐骨神经分支选择损伤模型大鼠脊髓背角的表达变化
为探讨脊髓内5-HT1受体亚型在神经病理性痛信息传递和调控中的作用,本研究利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术观察了坐骨神经分支选择性损伤(SM)模型大鼠脊髓背角内5-HT1A、5-HT1B、5-HT1D、5-HT1E和5-HT1F受体亚型mR-NAs表达变化.结果表明:损伤侧脊髓背角内5-HL1A受体亚型mRNA的表达水平在术后3 d明显增高,7 d达到高峰,随后开始下降,术后28 d与正常对照相比仍有显著变化;5-HT1B受体亚型mRNA的表达水平也于术后3 d开始显著增高,此后持续升高,至21 d达到高峰,28 d时有轻微下调,但高于对照水平;未观察到损伤侧脊髓背角内5-HT1D受体亚型mRNA表达水平的显著变化.5-HT1F受体亚型mRNA的表达水平于术后4 d显著增高,此后一直维持该表达水平至28 d.上述受体亚型在非损伤侧脊髓背角内的表达水平均无变化.在脊髓背角内未检测到5-HT1E受体亚型mRNA的表达.上述5-HT1受体亚型mRNA在SNI模型脊髓背角内具有不同的表达变化特点,提示不同的5-HT1各受体亚型在神经病理性痛信息的传递和调节中可能发挥着不同的作用.
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5-HT2～7受体亚型mRNAs在坐骨神经分支选择性损伤模型大鼠背根神经节的表达变化
本研究利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,观察了坐骨神经分支选择性损伤(SNI)所致神经病理性痛条件下,大鼠背根神经节(DRG)中5-HT2～7受体亚型mRNAs的时程表达变化.用RT-PCR方法在正常大鼠DRG中检测到5-HT2A、5-HT3、5-HT4、5-HT5A和5-HT7受体亚型mRNAs的表达,但未检测到5-HT2B、5-HT2c、5-HT5B和5-HT6受体亚型mRNAs.SNI能诱导5-HT2A、5-HT3、5-HT4和5-HT7受体亚型mRNAs在损伤侧DRG的表达上调.其中,5-HT2A受体亚型mRNA的表达在术后3 d时开始升高,持续增加至28 d;5-HT3受体亚型mRNA的表达在术后4 d时明显增加,14 d时达到高峰;5-HT4受体亚型mRNA于术后3 d的表达明显增加,21 d时达到高峰;5-HT7受体亚型mRNA的表达在术后1 d时即显著升高,一直维持高水平的表达至28 d.未检测到5-HT5A受体亚型mRNA的表达变化.在SNI对侧的DRG,各受体亚型mRNAs的表达未出现明显变化.部分5-HT受体亚型在SNI模型DRG的表达具有不同的时程变化特点,提示它们在SNI所致的神经病理性痛中发挥着不同的作用.
关键词： 5-羟色胺受体 坐骨神经分支选择性损伤 神经病理性痛 背根神经节 大鼠 -
5-HT1A受体亚型mRNA在坐骨神经分支选择性损伤模型大鼠脊髓和背根节中的表达变化
坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型是一种新型神经病理痛模型.本实验用SD雄性大鼠,分支结扎并切断左侧坐骨神经干的胫神经和腓总神经,保留腓肠神经分支,右侧仅暴露坐骨神经.术后1、2、3、4、7、14、21和28 d,用RT-PCR的方法对5-HT1A受体mRNA在腰髓的背角和背根神经节(DRG)的表达水平进行检测.结果显示,5-HT1A受体mRNA在损伤侧腰髓背角内的表达水平于1 d后开始升高,7 d时达高峰,随后逐渐下降,但仍高于正常水平.其表达水平在对侧脊髓背角内没有明显变化.在损伤侧DRG内,5-HT1A受体mRNA的表达水平于1 d后开始增高,4 d时达高峰,随后开始下降,但仍维持较高的表达水平;而损伤对侧DRG内的5-HT1A受体mRNA的表达没有变化.上述结果提示5-HT1A受体亚型可能在脊髓及外周伤害性信息的传递和调节中发挥着重要作用,本研究的结果为进一步了解5-HT1A受体在神经病理性痛中的作用机制提供了依据.
