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  • 广东地区两种兰花病毒病害的分子鉴定及检测

    作者:周国辉;陈晓琴;李梅辉;周洁浪;唐添华;冯盛祥;郭丽晶;张旺

    根据已报道的建兰花叶病毒(CyMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)基因组核苷酸序列,在其cp基因上下游设计PCR引物.CyMV预计扩增产物784bp,ORSV预计扩增产物604bp.以采集自广东省顺德的墨兰和文心兰表现病毒病症状的病株叶组织总RNA为模板,进行RT-PCR扩增.对预期大小的5个扩增产物进行克隆和测序,结果表明,来源于不同兰种或同一兰种不同兰场的病样CyMV引物扩增产物核苷酸序列存在少量差异,但均与世界各地的CyMV分离物cp基因高度同源;而来源于不同兰种的病样ORSV引物扩增产物核苷酸序列完全相同,与世界各地的ORSV分离物cp基因高度同源.因此可将侵染广东兰花的两种病毒鉴定为CyMV和ORSV.混合上述两种病毒的 PCR引物,采用双重RT-PCR扩增,对采自广东顺德23个兰场共153份样品进行病毒检测,76份(49.7%)检出CyMV,52份(34.0%)检出ORSV,2份(1.3%)同时检出CyMV和ORSV.

  • 建兰花叶病毒运动蛋白基因克隆及序列分析

    作者:刘志昕;吴豪;潘俊松;郑学勤

    从建兰花叶病毒(CyMV)石斛兰分离物中提取病毒RNA,用反转 录——聚合酶链式反应(RT-PCR)方法获得约500bp的运动蛋白基因片断,插入pGEM-T载 体克隆并测序。序列分析表明,该基因片断由474个核苷酸组成,和CyMV美国夏威夷分离物 、新加坡分离物相应基因核甘酸序列分别具有97.8%同源性;根据核酸序列推导该片断含有3 个部分重叠的开放阅读框架(ORF),分别编码14kD、12kD和10kD的多肽。

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