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基因转录与pre-mRNA剪接的偶联蛋白
真核基因的表达是一个复杂的过程,包括转录、pre-mRNA剪接、翻译等步骤.其中转录和pre-mRNA的剪接是基因表达中的两个重要环节,它们都要通过复杂的蛋白复合物来执行功能.目前研究发现这两个过程并不是绝对独立的,而是偶联在一起同时进行的.多种蛋白的偶联作用将二者联系在一起.RNA聚合酶Ⅱ、SKIP、SMN以及新近发现的人类P100蛋白不仅参与基因转录调节,同时它们在剪接加工中也具有相应的作用.
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利用RNAi建立脊髓性肌萎缩症的细胞模型
目的:应用RNA干扰沉默SMN1基因的表达建立脊髓性肌萎缩症(SMA)的细胞模型.方法:将pshRNA-SMN1重组质粒转染人骨髓问充质干细胞(hMSCs),经G418筛选得到能稳定表达目的shRNA的单克隆细胞系后将其诱导分化为神经元样细胞(NLCs)建立SMA细胞模型组.同期设立转染重组质粒pshRNA-0的对照组和未转染重组质粒的空白对照组.观察NLCs的细胞形态,采用免疫细胞化学染色分析NLCs的NSE和NF蛋白表达,用RT-PCR和免疫印迹方法检测NLCs的SMN mRNA及其蛋白表达.结果:诱导后各组细胞呈典型的神经元样细胞形态且NSE和NF蛋白表达阳性;其fl-SMN mRNA,△7-SMN mRNA及fl-SMN蛋白表达均较诱导前增加(P<0.05),但SMA细胞模型组的fl-SMN mRNA及蛋白表达仍明显低于对照组(P<0.01);而诱导后△7-SMN mRNA的表达在各组间差异无统计学意义(P>0.05).结论:SMN1 mRNA及其蛋白被抑制的MSCS诱导分化为NLCs后可以作为SMA的细胞模型.
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运动神经元生存蛋白及其相互作用蛋白研究进展
运动神经元生存蛋白(survival of motor neurons, SMN)是脊肌萎缩症的基因产物.目前对SMN蛋白的功能研究已成为探讨脊肌萎缩症发病机理的热点.本文就SMN蛋白的结构、组织分布及功能研究现状作一综述.
