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芳姜黄酮衍生物对WM35细胞增殖及凋亡的影响
目的:研究芳姜黄酮衍生物(ATD)对人皮肤黑色素瘤WM35细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法不同浓度(5~80μmol/L)ATD体外作用WM35细胞。CCK-8法检测增殖抑制率;AO/EB染色、倒置显微镜观察细胞凋亡形态;DNA片段化检测细胞凋亡;比色法检测 Caspase-3酶活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测Bax及Bcl-2蛋白表达。结果 ATD对WM35细胞有增殖抑制作用,呈时间-剂量依赖性(P<0.05)。ATD诱导WM35细胞凋亡,呈剂量依赖性(P<0.05),Caspase-3酶活性随药物浓度增加而增强(P<0.05)。随药物浓度增加,Bax/Bcl-2比值逐渐升高。结论 ATD对WM35细胞有抑制增殖及促凋亡作用,其机制是使凋亡相关蛋白Bax表达上调、Bcl-2表达下调,激活细胞凋亡途径关键酶Caspase-3,进而抑制肿瘤细胞分化与增殖。
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松油烯-4-醇对人黑色素瘤WM35细胞增殖及凋亡的影响
目的:研究松油烯-4-醇(T4O)对WM35细胞增殖及凋亡的影响并探讨其作用机制。方法:不同浓度 T4O 体外作用 WM35细胞。 CCK-8测抑制率;AO/EB 染色后倒置显微镜观察细胞形态;比色法测Caspase-3酶活性;流式细胞术测凋亡及周期;JC-1测线粒体膜电位(MMP);蛋白印迹测 Bax 及 Bcl-2表达。结果:T4O以时间-剂量依赖性方式抑制WM35细胞增殖。 T4O诱导WM35细胞凋亡,呈剂量依赖性,随药物浓度增加,Caspase-3酶活性逐渐增强,MMP逐渐降低,Bax/Bcl-2比值升高,周期阻滞在G2/M期。结论:T4O 对WM35细胞有抑制增殖及促凋亡作用,其机制是通过线粒体途径使凋亡相关蛋白 Bax 表达上调、Bcl-2下调,激活凋亡途径关键酶Caspase-3,使细胞周期阻滞在G2/M期。
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姜黄挥发油对WM35细胞增殖及凋亡的作用机制
目的 研究姜黄挥发油(turmeric volatile oil,TVO)对人表皮黑素瘤WM35细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 不同浓度(5~160mg/L) TVO体外作用WM35细胞.噻唑蓝(MTT)法测增殖抑制率;倒置显微镜观察细胞形态变化,碘化丙啶(PI)染色,观察荧光数目;DNA片段化检测细胞凋亡;比色法测Caspase-3酶活性;实时荧光定量RT-PCR测Bax及Bcl-2基因mRNA表达水平;流式细胞仪测细胞凋亡及周期.结果 TVO对WM35细胞有抑制增殖的作用,且呈时间-剂量依赖性(P<0.05).TVO诱导WM35细胞凋亡,呈剂量依赖性(P<0.05),Caspase-3酶活性随药物浓度增加而增强(P<0.05),Bax/Bcl-2表达水平比值随药物浓度增加而升高(P<0.05);细胞周期阻滞在S期.结论 TVO对WM35细胞有抑制增殖及促进凋亡的作用,其机制是使凋亡相关基因Bax表达水平上调、Bcl-2表达水平下调,激活细胞凋亡途径关键酶Caspase-3,将细胞周期阻滞在S期,进而抑制肿瘤细胞分化与增殖.
关键词: 姜黄挥发油 WM35细胞 凋亡 Caspase-3 实时荧光定量RT-PCR