首页 > 文献资料
-
CIK细胞对A549肺癌细胞株的诱导凋亡作用的研究
目的 研究多种细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)对A549肺癌细胞株诱导凋亡作用,并探讨其作用机制.方法 应用末端脱氧核苷酸转移酶﹙TdT﹚介导的脱氧核苷酸缺口末端标志(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法检测CIK细胞诱导凋亡的情况;通过免疫组织化学染色法检测A549细胞中凋亡相关基因p53、Fas、caspase-3,caspase-8,caspase-9、survivin蛋白,细胞增殖相关蛋白Ki-67的阳性表达率.结果 (1)TUNEL法检测结果:效靶细胞混合培养后,起初随时间延长凋亡细胞逐渐增多,5-14小时凋亡率明显上升,14-24小时凋亡率下降;(2)免疫组织化学染色结果表明,CIK实验组p53、Ki-67、survivin蛋白随作用时间延长而均下降,Fas、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白表达上调,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01).结论 (1)CIK细胞对A549肺癌细胞具有抗增殖及诱导凋亡作用;(2)CIK细胞对A549肺癌细胞的抗增殖作用机制可能与下调Ki-67蛋白的表达,使癌细胞处于静止期有关;(3)CIK细胞对A549肺癌细胞的诱导凋亡作用机制可能与下调p53、survivin蛋白的表达,上调Fas、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的表达有关,经由细胞凋亡的死亡受体和线粒体通路完成凋亡的启动和执行;(4)CIK细胞是一种新型高效具有较强杀伤体外肺癌细胞的免疫活性细胞,有可能用于临床上晚期肺癌的过继性免疫治疗.
-
天花粉多糖诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其Caspase-3和Caspase-8活化对凋亡的影响
目的:研究天花粉多糖(polysaccharide of snakegourd root)对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用、诱导凋亡的作用以及Caspase-3、Caspase-8活化对凋亡的影响.方法:采用噻唑蓝(MTT)法观察不同浓度天花粉多糖对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用；DAPI染色后荧光显微镜进行细胞凋亡核形态学观察；通过DNA琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段化分析,FITC- Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡率,分光光度比色法测定天花粉多糖诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡过程中Caspase-3、Caspasc-8活性变化.结果:MTT结果显示,天花粉多糖对人乳腺癌MCF-7细胞有生长抑制作用.10.0μmol/L以上浓度的天花粉多糖作用2d,DAPI染色可见核浓缩及边缘现象,DNA电泳出现特征性的凋亡条带.1.0、5.0、10.0和20.0μmol/L天花粉多糖处理的MCF-7细胞2d,细胞凋亡率分别为(5.2±1.3)％、(13.1±4.7)％、(27.6±6.8)％和(43.8±9.8)％；10.0μmol/L天花粉多糖处理MCF-7细胞1、2、3d,Caspase-3活性在2d达高(2.32±0.12) U/μg,而Caspase-8活性则在ld达高(1.92±0.11) U/μg,两者与对照组相比均有统计学显著性差异(P＜0.05).结论:天花粉多糖对人乳腺癌MCF-7细胞有生长抑制和诱导凋亡作用,其诱导凋亡的机制可能与Caspase-3、Caspase-8活化有关.
-
神经营养素-3对大鼠脊髓损伤后caspase-3基因表达的影响
[目的]研究神经营养素-3(NT-3)对大鼠脊髓损伤后caspase-3基因表达的影响,探讨NT-3在脊髓损伤修复中的作用.[方法]SD大鼠80只,分为生理盐水对照组和NT-3组.用RT-PCR分析方法观察两组caspase-3基因的表达情况.[结果]①脊髓损伤后caspase-3基因mRNA转录水平升高;②NT-3组与生理盐水对照组相比caspase-3基因转录水平下降(P<0.05).[结论]NT-3抑制caspase-3基因的表达,可能是促进神经纤维损伤后再生的一个重要因素.
