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Exoquick提取法文献资料
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非小细胞肺癌源性外泌体提取方法探讨
目的:比较3种提取非小细胞肺癌A549细胞培养上清中外泌体(Exosomes)的方法,为获得高质量的Exosomes提供参考.方法:分别采取超速离心法、进口ExoQuick-TC提取法、国产Ribo提取法提取A549细胞培养上清中的Exosomes.利用透射电镜进行形态学观察,2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠法进行蛋白定量,Western blot检测Exosomes表面标志物CD63表达.结果:3种方法均可提取到Exosomes,电镜下可观察到圆形膜性囊泡结构.进口ExoQuick-TC提取法及国产Ribo提取法提取样本浓度显著高于超速离心法(P＜0.05);3种方法提取样本均有Exosomes特异性标志蛋白CD63表达,超速离心法CD63表达高.结论:超速离心法、进口ExoQuick-TC提取法、国产Ribo提取法均可成功分离Exosomes,超速离心法获得的Exosomes纯度较高,应用试剂盒方法获得的Exosomes浓度高.
关键词： 外泌体 超速离心法 Exoquick提取法 Ribo提取法
