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  • 小鼠STING基因启动子的克隆鉴定及功能初步分析

    作者:徐妍妍;王艳艳;徐华国;周国平

    目的:克隆小鼠干扰素基因刺激因子(STING)基因启动子,并对其启动子活性和转录调控机制进行初步探讨.方法:利用PCR方法扩增小鼠STING基因5’上游1 005 bp(-927~+77)的片段,亚克隆至pGL3-basic质粒,然后通过步移缺失构建不同缺失片段的重组质粒.双荧光素酶报告活性分析检测重组质粒在NIH3T3中的活性,并利用生物信息学方法预测转录因子结合位点.结果:经酶切、测序鉴定,成功构建了小鼠STING启动子荧光素酶报告基因重组质粒.与pGL3-basic质粒相比,STING启动子重组质粒的相对荧光素酶活性增加(P<0.05).通过生物信息学软件预测小鼠STING启动子区域(-177~-48)可能含有GATA、IK2、MZF1、SP1/SP3、STAT等转录因子结合位点.结论:成功构建小鼠STING不同缺失片段的启动子荧光素酶报告基因重组质粒.通过活性比较,推测小鼠STING的核心启动子区位于-177~+77区域,其中可能含有多个潜在的转录因子结合序列.

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