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Pum文献资料
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缺失PUF家族基因的卵母细胞可以成熟和受精
目的:研究PUF家族基因[Pumilio1 (Pum1)和Pumilio2 (Pum2)]在雌性生育能力和生殖细胞减数分裂过程中的作用.方法:在Pum1基因位置携带loxP位点的Pum2基因全敲鼠的基础上,利用生殖细胞特异性表达的Cre-Vasa-Cre介导Puml基因条件性敲除,以此获得Pum基因双敲小鼠模型Vasa-cre:PumlF/F Pum2-/-(VDKO).同时,对Pum基因双敲小鼠进行生殖表型分析.结果:①交配实验结果表明,雌性VDKO小鼠的生育能力显著下降,但仍可以产生后代;②VDKO小鼠卵母细胞体外成熟过程不受影响.结论:Pum蛋白不影响小鼠卵子发生发育过程.
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Pum基因在小鼠海马的转录
目的:依据Pum蛋白序列寻找和人类亲缘关系较近的动物模型,并在动物模型的脑组织上进行PummRNA的定性和定位.方法:查找相关动物的Pum蛋白序列,构建生物进化树,寻找合适的动物模型.RT-PCR扩增Pum片断,接入TA载体制作亚克隆,转化细菌后筛选,扩增、抽提,然后测序鉴定.体外转录Pum基因的mRNA探针,将其和脑组织冰冻切片原位杂交、显色.结果:生物进化树提示,小鼠是合适的动物模型;原位杂交结果显示,小鼠海马区存在Pumn1和Pum2 mRNA的表达.结论:小鼠是研究Pum基因在海马转录的合适动物模型.
