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凝胶阻滞文献资料
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伤寒沙门菌调节因子UhpA的功能研究
目的:探讨伤寒沙门菌调节因子UhpA的功能.方法:用载体pBAD介导回补uhpA至伤寒沙门菌uhpA基因缺陷变异株,用qRT-PCR观察cysM和treB基因表达,用表达载体pET-22b原核表达UhpA蛋白,用凝胶阻滞试验观察UhpA蛋白与cysM和treB启动子区域DNA片段的结合.结果:成功构建pBADuhpA重组质粒,在uhpA缺陷变异株中回补uhpA基因后,cysM和treB的表达明显恢复,但UhpA-His6蛋白与cysM和treB的启动子区域DNA片段无明显结合.结论:伤寒沙门菌UhpA在高渗应激条件下能促进硫代谢及海藻糖代谢相关基因表达,且可能为间接作用.
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穿膜肽引导核酸靶向性进入神经细胞的研究
目的 研究来源于狂犬病毒糖蛋白的一个新型衍生肽(RVG-derived peptide,RDP),是否能够引导DNA特异性地进入神经细胞.方法 首先,通过琼脂糖凝胶电泳阻滞实验和圆二色谱确定RDP与DNA复合物的佳比例以及相互作用,将佳比例的复合物转染入神经母瘤细胞;其次,将RDP包裹的DNA复合物(RDP/pDNA)通过静脉给药的方式给予小鼠,组织冷冻切片检测DNA在各组织的表达情况.结果 体外试验结果表明,目的 基因仅在神经细胞中表达;体内试验结果表明,RDP/pDNA组小鼠的脑、肾、肝可检测到目的 蛋白,其中脑内目的 蛋白含量高.结论 RDP可作为一种靶向神经细胞的基因载体,在未来的非病毒载体应用中可能具有较大的潜力.
