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接枝赖氨酸D155树脂固定化腈水解酶及其性质
以赖氨酸(Lys)修饰阳离子交换树脂D155合成出赖氨酸修饰两性阳离子交换树脂(Lys-D155),再以该树脂为载体,制备出固定化腈水解酶(I-Nit-D155),后以I-Nit-D155为催化剂水解R,S-扁桃腈研究制备固定化腈水解酶的优化条件、主要酶学性质并对水解产物进行表征.红外分析表明,经赖氨酸修饰的D155成功制备出固定化腈水解酶I-Nit-D155.制备I-Nit-D155的优化条件为:室温、pH 5.25、载体游离氨基/戊二醛/腈水解酶摩尔比1:0.11:2.12×10-4,I-Nit-D15活力为10 ~ 15 U/mg、偶联率43.2%、Km值23.11 mmol/L,重复使用15次后活力仍可保持50%以上;I-Nit-D15水解R,S-扁桃腈的产物的熔点、比旋光度等分别为133℃、-155.57°,与R-扁桃酸一致,经红外、1H-和13C-核磁共振波谱表征确证为R-扁桃酸.
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发酵液中R-扁桃酸的离子交换分离纯化
研究发酵液中R-扁桃酸的离子交换分离工艺.采用711-OH型阴离子交换树脂从发酵液中分离R-扁桃酸时,适动态吸附条件为上柱液pH值6.0~7.0、R-扁桃酸浓度70~80 mmol/L、苯乙酮酸浓度8~10 mmol/L和流速0.5 Bv/h,适动态解吸条件为2% HCl为解吸液、解吸流速1.5 Bv/h.采用本工艺,发酵液中R-扁桃酸的总提取率为90.3%.