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载脂蛋白CⅡ微卫星DNA检测的方法学建立
目的建立准确检测载脂蛋白CⅡ(apoCⅡ)微卫星DNA(TG)n(AG)m的方法. 方法采用套式聚合酶链反应扩增样品DNA,将扩增产物上样于变性聚丙烯酰胺凝胶,高压电泳,凝胶银染后按等位基因梯阶标准判定样品基因型;对等位基因(TG) 20(AG)8进行测序. 结果 (TG)n(AG)m位点,共检出12个等位基因(17、18、26～35),36个基因型.(AG)m位点,共检出4个等位基因(6～9),7个基因型.DNA测序确证该等位基因为(TG) 20(AG)8.结论该法准确、快速、简便,适用于科研及大规模人群检查.
关键词： apoCⅡ 微卫星DNA 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 等位基因梯阶标准 -
错配修复基因hMSH2在膀胱癌组织中的表达
目的 探讨膀胱癌组织中hMSH2与膀胱癌病理参数的关系.方法 以36例新鲜膀胱癌组织和自身外周血细胞为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定技术,观察hMSH2在膀胱癌组织中的表达.结果 36例新鲜膀胱癌组织中hMSH2突变≥1个位点以上为10例,≥2个位点以上为7例;hMSH2基因突变在膀胱肿瘤组织中呈现低表达,并且与肿瘤的分期、分级及淋巴结转移无关(P＞0.05);复发癌中hMSH2突变卓高于原发癌,羔异有显著性(P＜.01).用hMSH2的5个外显子突变分析的检出率为27.78%(10/36).结论 hMSH2基因突变在膀胱肿瘤组织中呈现低袁达,并且与肿瘤的分期、分级及淋巴结转移无关.复发癌hMSH2基因突变率高于原发癌.提示hMSH2突变在膀胱癌复发过程中扮演了重要角色.
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肝细胞癌染色体4q和8p杂合性丢失的研究
目的:检测肝细胞性肝癌患者的4q和8p两个区域上相关的9个微卫星位点的杂合性丢失频率,探讨杂合性丢失与临床病理学特征的关系.方法:选取45例信息性肝癌标本,提取组织DNA,并检测浓度,然后进行PCR扩增,后将产物通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离并观察目的条带有无密度减少或丢失.结果:45 例信息性肝癌病例的9个微卫星位点总染合性 缺失率为66.7%.其中D8S552的LOH率高为41.9%,通过χ2检验或Fisher确切概率法进行统计学分析(P<0.05),得到该位点在性别(P=0.023),血清AFP(P=0.004),有无肝内转移(P=0.023)中均有统计学差异.D4S415为22.5%,D4S3331为22.3%,D8S1810为18.8%,D4S2954为15.4%,D4S3030为15.4%; D8S1725为12.5%,D8S1827为9.8%,D8S1754为6.3%.结论:染色体4q和8p上D4S415 、D4S3331、D8S552位点杂合性丢失是肝细胞性肝癌发生发展的重要事件,提示其临近部位可能存在潜在的抑癌基因;为其他肝癌相关抑癌基因的研究提供理论基础.
关键词： 肝细胞性肝癌 4q 8p 杂合性缺失 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
