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尿液中红桂木凝集素结合蛋白的检测及临床意义
目的建立酶标记红桂木凝集素(ALL-HRP)夹心法检测尿液中ALL结合蛋白. 方法制备ALL-HRP并经Sephadex G-200纯化作为酶标凝集素,ALL为包被物 ,确定适包被浓度及ALL-HRP工作稀释度,夹心酶联检测尿液中ALL结合蛋白(U-LBP). 经精密度、重现性等实验并制备标准曲线. 结果以U-LBP作标准制备的标准曲线线性检测范围为9.4～150 μg/ml. 本法测定几种疾病的尿U-LBP/Cr(μg/μmol),以SLE肾病为高44.06±32.47,其次是急性肾炎38.07±26.13,肾病综合征32.57±20.33,血尿25.30±14.62, 慢性肾炎18.03±13.70,糖尿病15.69±12.08,与正常对照组相比,均有显著性差异.本法批内CV为8.86%,批间CV为9.89%.结论 ALL-HRP夹心酶联法检测U-LBP方法简便,结果稳定,可望在临床上推广使用.
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红桂木凝集素结合蛋白在肾病尿液检测中的意义
目的:建立检测尿液中ALL结合蛋白的夹心酶联免疫法.方法:采用红桂木凝集素(ALL)为包被物,确定适包被浓度及酶标记红桂木凝集素(ALL-HRP)工作稀释度,检测尿液中ALL结合蛋白(U-LBP).结果:本法测定几种疾病的尿U-LBP/Cr (g/mol),以SLE肾病为高(44.06±32.47),其次是急性肾炎(38.07±26.13),肾病综合征(32.57±20.33),血尿(25.30±14.62),慢性肾炎(18.03±13.70),其它内科疾病(8.19±5.62),与正常对照组相比,均有显著性差异(P<0.01).结论:ALL-HRP酶联法检测U-LBP方法简便,结果稳定,可望在临床上推广使用.
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红桂木凝集素糖蛋白的特征及其糖肽键性质的分析
目的:探讨红桂木凝集素(Artocarpus Lengnanensis Lectin,ALL)的糖蛋白特征及其糖肽键类型.方法:经Gal-Sepharose 6B亲和柱层析,从红桂木种子纯化获红桂木凝集素.以链霉蛋白酶将ALL降解,Sephadex G-25层析,分离得糖肽,用化学及物理方法分析单糖组成,以β-消除反应及凝集素结合试验分析糖肽键类型.结果:ALL和糖肽均含氨基半乳糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖;β-消除反应后,240 nm呈明显紫外吸收增加;ALL可与木菠萝凝集素结合.结论:ALL是一种糖蛋白,由两种分子量接近的亚基组成,其糖链与多肽连接类型为O-连接.
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红桂木凝集素对树突状细胞生长的影响
目的 研究红桂木凝集素(ALL)对人外周血单核细胞来源的树突状细胞生长的影响.方法 取健康人外周血分离单个核细胞,分别给予重组人粒细胞-巨噬细胞因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和不同浓度的ALL进行培养.用倒置显微镜观察其形态;CCK-8法检测细胞增殖;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测TNF-α、IL-12/P70水平;流式细胞仪检测细胞表型.结果 不同浓度的ALL均能显著促进树突状细胞增殖,并促进IL-12/P70和TNF-α分泌,随着浓度的增加增殖率、IL-12/P70和TNF-α水平逐渐提高(P＜0.05).结论 ALL能有效促进人外周血单核细胞来源的树突状细胞的成熟及增殖.
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红桂木凝集素对Jurkat T淋巴细胞生长的影响
目的 研究红桂木凝集素(ALL)对Jurkat T淋巴细胞生长的影响.方法 将ALL单独作用于CD4+T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞株,WST-8比色法检测细胞增殖;倒置显微镜观察细胞生长变化;酶联免疫夹心法(ELISA)检测IL-2、IL-10和IFN-γ的分泌水平.结果 ALL(0.36～360 μg/ml)单独作用后,能够抑制T细胞的增殖,抑制率为1.82%～59.17%(P＜0.01),且呈剂量-效应关系,其半数细胞抑制剂浓度(IC50值)为59.72 μg/ml,且镜下可见细胞集落形成受到抑制;ALL对细胞因子IL-2和IFN-γ的分泌均有明显促进作用,ALL(1.8 μg/ml)处理组IL-2和IFN-γ的分泌与空白对照组比较分别增加了11.69倍和21.29倍(P＜0.01).结论 ALL能有效抑制Jurkat T淋巴细胞的生长,且具有剂量-效应关系.
