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ZNF191 mRNA在卵巢恶性肿瘤中的表达及临床意义
采用RT-PCR方法检测31例卵巢恶性肿瘤组织和31例正常卵巢组织中ZNF191 mRNA的表达.结果显示,与正常卵巢组织相比, ZNF191 mRNA在卵巢恶性肿瘤组织中的表达显著下调 (P<0.01);在浆液性癌、黏液性癌、宫内膜样癌等上皮性卵巢癌中的下调程度显著大于颗粒细胞瘤(P<0.05),而在上皮性卵巢癌各组织类型间无显著差异;ZNF191 mRNA的表达水平在不同分期、不同分化程度的卵巢恶性肿瘤中无显著差异.本组资料提示ZNF191基因的变异参与了卵巢恶性肿瘤的发生,可能在卵巢恶性肿瘤的早期发病机制中发挥作用,.
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转录因子ZNF191腺病毒表达载体的构建及鉴定
目的:构建转录因子ZNF191腺病毒表达载体,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:从HEK293细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增ZNF191基因,并将ZNF191亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV中,酶切及DNA测序鉴定后,将含ZNF191基因的重组穿梭质粒pAdTrack-ZNF 191经PmeⅠ线性化后转化pAdEasy-1感受态细菌.pAdEasy-ZNF191质粒经Pme Ⅰ线性化后转染293T细胞,包装重组腺病毒Ad-ZNF191,并进行PCR鉴定、Western blot检测受感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白的表达.结果:证实pAdTrack-CMV-ZNF191及pAdEasy-ZNF191质粒构建正确,收获病毒后PCR及DNA测序结果证明Ad-ZNF191包装成功,腺病毒感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白表达明显提高.结论:成功构建了ZNF191基因重组腺病毒表达载体Ad-ZNF191,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.