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Let-7c在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义
目的:探讨Let-7c在乳腺浸润性导管癌中的表达情况及与各种临床病理特征的关系.方法:采用茎环RT-PCR方法检测40例乳腺浸润性导管癌及其对应的正常乳腺组织中Let-7c的表达,分析Let-7c表达与临床分期、淋巴结转移、增殖指数等临床病理特征的关系.结果:用茎环RT-PCR方法检测Let-7c表达的敏感性和特异性良好; Let-7c在乳腺癌组织中的表达显著低于正常组织(P＜0.05);Let-7c的表达与乳腺癌的增殖指数有关(P＜0.05),与雌孕激素受体状态亦有关,与是否绝经、乳腺癌的TNM分期、淋巴结转移未见显著统计学意义(P＞0.05).在高增殖指数、雌孕激素受体阴性的肿瘤组Let-7c表达明显降低.结论:Let-7c在乳腺浸润性导管癌中的表达异常,可能和乳腺癌的发生和发展有关,有望成为乳腺癌新的预后指标及治疗靶点.
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脂氧素A4对高氧损伤小鼠肺上皮细胞的保护机制研究
目的 探讨脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)通过let-7c基因/转化生长因子 β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)信号通路保护高氧损伤小鼠肺上皮细胞MLE-12的作用机制.方法 体外传代培养MLE-12细胞,待其生长至接近融合状态时,随机分为高氧空白组、LXA4组、let-7c过表达组、let-7c沉默组、let-7c沉默+LXA4组.各实验组均暴露于85%氧气中,LXA4组给予LXA4干预,let-7c过表达组和let-7c沉默组分别利用脂质体3000转染建立let-7c过表达或let-7c沉默细胞株.let-7c沉默+LXA4组给予LXA4干预let-7c沉默细胞株.实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞外基质,包括 α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ,COL-Ⅰ)、TGF-β1信号通路及相关下游基因Smad 2、Smad 3、Smad 4、转化生长因子β1受体(TGF-βR1)、转化生长因子 β2受体(TGF-βR2)mRNA水平.Western blot检测TGF-β1信号蛋白Smad 2、Smad 3、Smad 4、p-Smad 2、p-Smad 3和TGF-βR1的表达.结果 LXA4组和let-7c过表达组细胞α-SMA、COL-Ⅰ、Smad 3、Smad 4、TGF-βR1、TGF-βR2 mRNA(×10-4)[LXA4组:(24.3±2.1)、(14.6±0.2)、(17.0±0.0)、(14.9±0.1)、(20.8±0.1)、(9.0±0.0),let-7c过表达组:(12.2±0.5)、(3.0±0.0)、(3.1±0.0)、(9.6±0.4)、(28.5±0.2)、(7.6±0.1)]低于高氧空白组[(51.4±0.5)、(32.0±0.1)、(40.6±0.2)、(16.3±0.1)、(89.1±1.1)、(19.3±0.2)],let-7c沉默组和let-7c沉默+LXA4组[let-7c沉默组:(87.3±7.0)、(38.5±0.3)、(48.0±0.2)、(56.5±0.2)、(126.0±0.9)、(33.1±1.0),let-7c沉默+LXA4组:(144.5±12.9)、(86.3±3.0)、(91.5±4.7)、(86.5±3.3)、(109.0±4.5)、(45.6±1.6)]高于高氧空白组;LXA4组和let-7c过表达组细胞Smad 2、Smad 3、Smad 4、p-Smad 2、p-Smad 3、TGF-βR1蛋白低于高氧空白组,let-7c沉默+LXA4组p-Smad 2、p-Smad 3高于高氧空白组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 LXA4可能通过let-7c/TGF-β1信号通路发挥对高氧损伤小鼠肺上皮细胞的保护作用.
