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醋制甘遂减毒的血浆代谢组学研究
目的 比较甘遂醋制前后引起的大鼠血浆代谢组的变化,探讨甘遂醋制减毒可能的代谢调控机制.方法 选取SD大鼠30只,适应1周后随机分为5组:对照组、甘遂低剂量组(7.875 g/kg)、甘遂高剂量组(15.75 g/kg)、醋制甘遂低剂量组(7.875 g/kg)和醋制甘遂高剂量组(15.75 g/kg),每组6只,持续给予甘遂和醋制甘遂14 d后,分别于给药前、给药14d和停药7d取各组大鼠血浆,后加入重水和PBS缓冲溶液制备血浆检测样品.收集各组血浆样品的1 HNMR谱,运用正交偏小二乘判别法(orthogonal partial least-squares-discriminant analysis,OPLS-DA)分析.结果 与甘遂组相比,醋制甘遂组血浆中脂质、3-羟丁酸盐、葡萄糖是升高的,乳酸、肌酸/肌酸酐是降低的,且醋制甘遂组血浆代谢谱特征更靠近正常组.停药7d后,醋制甘遂组恢复较好.结论 甘遂醋制后具有减毒作用,能够调控机体能量代谢、脂肪代谢,降低肝脏和肾脏的毒性损伤.这种基于核磁共振波谱和多变量分析的代谢组学方法能够从整体上阐明甘遂醋制减毒的代谢调控机制.
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醋制甘遂化学成分的研究
目的:分离和鉴定醋制甘遂的化学成分.方法:用色谱技术进行分离、纯化,通过理化常数和波谱分析鉴定化合物结构.结果:从乙醇提取物中分离鉴定了9个化合物,分别为大戟醇(1)、麦芽酚(2)、β-谷甾醇-3-O-6-硬脂酰葡萄糖苷(3)、5-羟基麦芽酚(4)、棕榈酸(5)、棕榈酸甘油酯(6)、丁二酸(7)、β-谷甾醇(8)、胡萝卜苷(9)结论:化合物2、4、6、7为首次从甘遂中分离得到.
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基于NMR的代谢组学对醋制甘遂减毒作用的研究
目的:在进一步明确甘遂毒性作用的基础上,从整体上阐明不同剂量醋制甘遂对大鼠的减毒作用.方法:应用核磁共振技术(NMR)和正交-偏小二乘判别分析(OPLS-DA)方法分析给予大鼠甘遂(7.875、15.75g/kg)和醋制甘遂水提取物(7.875、15.75g/kg)后,大鼠尿液代谢物变化,并结合血浆生化分析和肝、肾组织病理切片HE染色检测,明确醋制甘遂的减毒作用机制.结果:OPLS-DA分析结果显示,甘遂组能够引起大鼠尿液中柠檬酸,琥珀酸,酮戊二酸、肌酸/肌酐含量降低和牛磺酸、甜菜碱、TMAO的含量增加.但7.875 g/kg醋制甘遂组中,仅引起柠檬酸和α-酮戊二酸含量显著降低,而15.75 g/kg醋制甘遂组会导致琥珀酸,柠檬酸和α-酮戊二酸含量显著降低,牛磺酸,甜菜碱和TMAO含量升高.结论:醋制甘遂的减毒作用具有剂量依赖性,是通过干预甘遂毒性生物标志物和下调肝肾毒性传统指标来发挥其减毒作用.