首页 > 文献资料
-
60Co照射及低温保存对转基因细胞影响的分析
目的观察经放射前后的转基因细胞Tca8113/TNF-α的TNF-α的分泌情况,为转基因细胞经致死剂量的放射线灭活作为"瘤苗"应用于临床前TNF-α基因的有效表达提供依据.方法利用基因转染技术,用逆转录病毒载体将肿瘤坏死因子基因(TNF-α基因)转导入人舌癌Tca8113细胞,并获得表达;在此基础上,通过ELISA法分析转基因细胞Tca8113/TNF-α在60Co放射组及未放射组的TNF-α分泌量的变化以及经液氮储存48h、一周复苏后的TNF-α分泌量的变化.结果 (1)60Co放射组转基因细胞Tca8113/TNF-α的TNF-α的分泌量(x±s)(pg/ml/106细胞/24h)平均高达(110±5.62),而未转基因的Tca8113细胞的上清液中未检测到TNF-α,统计学上有明显的差异性(P＜0.01);(2)经频率为439.5cGy/min,总剂量为10 000cGy的60Co放射后TNF-α分泌量降低,但在4～6d时有一分泌高峰;(3)转基因细胞Tca8113/TNF-α经60Co放射后在经48h及一周的液氮内储存后TNF-α能够分泌,其分泌量的变化趋势同储存前.48h组和一周组之间无明显的统计学差异性.结论转基因细胞Tca8113/TNF-α作为"瘤苗"应用时,目的基因的表达可初步评价为有效.
-
转基因细胞Tca8113/TNF-α的体外致突变性研究
目的观察转基因细胞Tca8113/TNF-α的致突变作用,将转基因肿瘤细胞作为"瘤苗"的临床应用的安全性提供依据.方法利用基因转染技术,用逆转录病毒LXSN*TNF-α载体系统,将肿瘤坏死因子基因(TNF-α基因)转导入人舌癌Tca8113细胞,通过遗传毒理学Ames实验对转基因的Tca8113/TNF-α细胞的细胞DNA及其培养上清液进行体外的致突变试验研究.结果 (1)DNA组菌落数大值(x±s): 150.5±11.2/160.2±7.6 (TA97); 34.0±2.2/34.4±3.2 (TA98); 139.8±4.6/130.8±7.2 (TA100); 264.0±14.6/254.4±8.2(TA102).(2)培养上清液组菌落数大值(x±s): 140.5±11.2/155.2±7.6 (TA97); 34.0±1.0/36.4±7.2 (TA98); 145.6±5.6/164.4±6.2 (TA100); 254.0±6.0/284.4±8.2 (TA102).结论 TNF-α基因转导Tca8113细胞不会引起基因突变,转基因细胞作为"瘤苗"的应用初步评价为安全可靠的.
关键词： 逆转录病毒 基因治疗 Tca8113/TNF-α TNF-α Ames试验
