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基因PⅡN文献资料
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PTEN基因诱导人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡及bcl-2蛋白表达下调
目的探讨PTEN基因对人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响,阐明PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的机理.方法 PTEN基因体外转染SHG-44细胞,筛选阳性细胞克隆,以原位杂交、免疫组化方法检测PTEN基因的表达情况采用透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况以免疫荧光法检测bcl-2基因的表达.结果 PTEN基因转染的SHG-44细胞有PTEN基因和蛋白的表达.透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞浆浓缩、核碎裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现;流式细胞仪示细胞周期从G1期到S期发生抑制,并且在G1期峰前出现一明显的凋亡峰(12.9%);细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带;bc1-2的表达也显著下调.转染空载体和未转染的SHG-44细胞无明显的凋亡表现.结论 PTEN基因可诱导SHG-44细胞凋亡,并下调bcl-2蛋白的表达,这可能是PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的分子机制之一.
