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TdT测定法文献资料
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磷烯菌素诱导HL-60细胞凋亡及其与增殖周期的关系
目的探讨一种新型的DNA拓扑酶-Ⅱ抑制剂磷烯菌素(FST)对人急性粒细胞白血病细胞株HL-60的杀伤机理.方法 采用流式细胞术(FCM)、TdT联合FCM及Ladder DNA三种方法研究FST对HL-60细胞凋亡的诱导作用及其与增殖周期的关系.结果:FCM(乙醇抽提法)显示:10μmol FST作用6 h未引起HL-60凋亡,100μmol/L时出现明显"亚G1峰",但1000μmol/L诱导时,却不出现凋亡而呈"冰冻"现象.TdT联合FCM表明:10μmol/LFST作用6h,即有明显细胞凋亡,且凋亡发生在整个细胞周期.Ladder DNA测定提示:100μmol/L FST作用HL-60细胞6h,其DNA凝胶电泳出现典型梯状图谱.结论1.FST诱导HL-60细胞死亡具有异质性:低剂量触发凋亡,高剂量诱导坏死.2.TdT联合FCM是一种灵敏的凋亡检测手段,它能同时测定细胞DNA含量及断裂,故能用以研究细胞凋亡及其与增殖周期的关系;3.FST诱导的凋亡似乎没有细胞周期特异性.