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PKCα活性在膀胱癌BIU-87细胞增殖中的作用及其机制
目的:探讨使用蛋白激酶 Cα( protein kinase Cα,PKCα)特异性抑制剂Safingol抑制其活性后对膀胱癌BIU-87细胞增殖能力的影响.方法:应用PKCα抑制剂Safingol、PKCδ特异性抑制剂Rottlerin和PKC激活剂PMA(phorbol-12-myristate-13-acetate)处理人膀胱癌BIU-87细胞,通过MTT法检测细胞增殖能力,RT-PCR及Western印迹法检测立早基因c-fos和c-jun mRNA和蛋白的表达,FCM检验细胞周期的改变.结果:PKCα特异性抑制剂Safingol可明显抑制人膀胱癌BIU-87细胞的增殖并呈剂量依赖性;而PKCδ特异性抑制剂Rottlerin则无此作用,但能提高BIU-87细胞的增殖能力;PKC激活剂PMA则能明显增加BIU-87细胞的增殖能力;FCM检测结果显示,抑制PKCα的活性可使细胞阻滞于G0/G1期;RT-PCR及Western印迹法检测结果表明, c-fos与c-jun的表达与PKCα的活性相关.结论:抑制PKCα活性可明显抑制膀胱癌细胞的增殖能力,其作用机制可能与抑制c-fos和c-jun的表达有关.
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奈达铂与顺铂对膀胱癌细胞系BIU-87作用的体内外实验比较
目的 比较奈达铂与顾铂对膀胱癌细胞系BIU - 87的体内外杀伤作用及毒副作用.方法 用MTT法检测比较奈达铂与顺铂对BIU - 87细胞系的抑制率;用裸鼠接种实验检测比较奈达铂与顺铂对裸鼠BIU- 87移植瘤的抑制作用及毒性作用.结果 奈达铂在体外对BIU - 87细胞系的抑制率与顺铂相似,但对裸鼠移植瘤抑制力更强.奈达铂毒性反应较轻.结论 在膀胱癌化疗中,奈达铂可能比顺铂更具优势.
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量子点对膀胱癌BIU-87细胞抗原的标记检测
目的:探讨不同的量子点免疫荧光组织化学方法对膀胱癌BIU-87细胞抗原特异性标记的效果,以优化细胞标记方法.方法:分别采用量子点免疫荧光组织化学三步法、二步法、一步法检测前列腺干细胞抗原(PSCA)在膀胱癌BIU-87细胞中的表达情况,观察并分析三种方法特异性标记的效果.结果:PSCA特异性的表达于BIU-87细胞胞质或膜,三种方法在紫外光激发下均能观察到表达部位明显的红色荧光,三步法实验技术成熟,量子点标记的链霉亲和索性质稳定,检测灵敏度高,背景清晰,但实验步骤繁琐,耗时较长,不宜用于活细胞标记;二步法实验步骤和操作时间都相对有所减少,但量子点标记的二抗性质不稳定,非特异吸附较强;一步法操作简便,省时,标记效果明显,特异性强,但是标记一抗成本较高,且对一抗的剂量要求较大.结论:三种量子点荧光标记方法均能对固定细胞表面抗原进行特异性标记,需根据不同实验需求选择合适的标记方法以达到佳实验效果.特异性一步法量子点荧光标记在活细胞及活体靶向成像示踪中具有巨大的应用前景.
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PBK/TOPK表达对膀胱癌BIU-87细胞增殖及迁移能力的影响
目的 探讨PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶(PDZ-binding kinase/T-LAK cell-originated protein kinase,PBK/TOPK)在膀胱癌中的表达及其表达对BIU-87细胞增殖及迁移能力的影响.方法 采用实时定量PCR及免疫印迹试验检测40例配对膀胱癌及癌旁正常组织中PBK/TOPK的表达,随后,分别干扰及过表达PBK/TOPK在BIU-87细胞中的表达,检测PBK/TOPK表达对细胞增殖及迁移能力的影响.结果实时定量PCR及免疫印迹试验检测结果一致表明PBK/TOPK在膀胱癌中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.05).干扰PBK/TOPK表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力明显下降(P<0.05);而PBK/TOPK过表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力明显增强(P<0.05).结论 PBK/TOPK在膀胱癌组织中, 其表达有助于膀胱癌细胞的增殖及迁移.
关键词： PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶 膀胱癌 BIU-87 增殖 迁移
