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生存素在结肠癌患者中的表达及临床意义的研究
目的:研究抗凋亡蛋白生存素(survivin)在结肠癌患者的癌组织和外周血中的表达,以评估其临床应用价值.方法:用免疫组化技术检测28例结肠癌患者组织中生存素的表达,用逆转录-实时定量PCR技术检测了28例结肠癌患者癌组织和13例非癌性结肠病变组织和30名正常人外周血中生存素的表达.结果:结肠癌组织中生存素蛋白的表达率为96.4%.生存素基因在结肠癌组织中的表达率为100%,mRNA的平均拷贝数为1.22×105/mg;在非癌性结肠病变组织中的表达率为46%,mRNA的平均拷贝数为1.59×103/mg,两者间mRNA的表达率和表达量差异均有显著性(P＜0.01;P＜0.05).81.5%的结肠癌患者外周血中检测到生存素转录本,30名正常人外周血中均未检测到.结论:生存素的表达与结肠癌密切相关,患者外周血中检测到生存素基因的转录本提示患者外周血循环中可能存在从癌组织脱落的肿瘤细胞,因此在外周血中检测生存素的转录本可能是观察肿瘤复发、判断疾病预后的良好指标.
关键词： 生存素 抗凋亡蛋白 逆转录-实时定量聚合酶链反应 结肠癌 -
GCS和MDR1与白血病细胞耐药形成的关联研究
目的 探讨葡萄糖神经酰胺合成酶基因(glucosylceramide synthase gene,GCS)和多药耐药基因(multidrug resistance 1 gene,MDR1)在人白血病多药耐药细胞株K562/A02耐药形成中的相关性,以便为逆转白血病细胞耐药提供新的思路.方法 应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)方法检测野生株K562及其耐药株K562/A02中GCS、MDR1基因的表达情况;采用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi),将靶基因为GCS的小干扰RNA(GCS siRNA)和靶基因为MDR1的小干扰RNA(MDR1 siRNA)分别传染K562/A02细胞后,通过定性和荧光实时定量PCR的方法观察GCS及MDR1 mRNA的基因沉默现象及两者之间的交互影响.结果 KS62/A02细胞GCS和MDR1 mRNA的表达明显强于药物敏感株K562细胞;GCS siRNA组K562/A02细胞GCS和MDR1基因表达均被抑制,抑制率分别为73%(59%～82%)和67%(38%～82%);MDR1 siRNA组K562/A02细胞MDR1基因被抑制,抑制率为81%(63%～91%),GCS基因表达无改变.结论 GCS与MDR1 mRNA的表达在K562/A02细胞呈正相关,特异性的沉默GCS基因可以下调MDR1 mRNA的表达水平.
