您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
特异性细胞毒试验文献资料
-
人巨细胞病毒特异性淋巴细胞的体外活化与增殖
目的:寻找一种安全有效的HCMV特异性淋巴细胞体外活化增殖方法.方法:分离外周血单核细胞,用白介素-4(IL-4)和粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)诱导分化为未成熟树突细胞,流式细胞仪检测表面特征标志;从AD169感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)提取HCMV抗原,以未成熟树突细胞作抗原呈递细胞,共同刺激自体淋巴细胞的活化增殖,2 d后检测TNF-α的分泌;继续刺激12d后,收获淋巴细胞作为效应细胞,以吞噬HCMV抗原的自体树突细胞作靶细胞,检测被杀伤细胞LDH的释放,估计其特异性细胞毒功能.结果:①单核细胞经IL-4和GM-CSF刺激4 d分化为未成熟树突细胞,高表达CD1a(87.5%);低表达CD14(4.2%)、CD83(48.4%)、CD86(45.8%)和HLA-DR(55.4%).②HCMV感染者的淋巴细胞经自体未成熟DC和HCMV抗原诱导2 d后,细胞因子TNF-α的分泌显著增加(P＜0.05).③继续诱导12 d后,部分淋巴细胞转化为HCMV特异性细胞毒T细胞,能特异性杀伤靶细胞(P＜0.01).结论:IL-4和GM-CSF可有效地促使HCMV感染者单核细胞转化为树突细胞,这些细胞能有效呈提HCMV抗原至自身淋巴细胞(HCMV感染者),并使其活化增殖.这为HCMV感染的免疫预防和治疗进一步提供了依据.
