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淡豆豉异黄酮对大鼠成骨细胞增殖及雌激素受体表达的影响
目的 观察淡豆豉异黄酮对大鼠成骨细胞增殖及雌激素受体表达的影响.方法 采用改良组织块法分离培养新生SD大鼠颅骨成骨细胞,分别给予不同质量浓度淡豆豉异黄酮(1、10、100、1 000 μg/L)、1 000μg/L淡豆豉异黄酮+ 10 nmol/L雌激素受体拮抗剂ICI 182780、1 000μg/L大豆异黄酮进行干预,以1 nmol/L 17β-雌二醇作为阳性对照,MTT法检测成骨细胞增殖情况;RT-PCR和Western blot法分别检测成骨细胞ERβ mRNA及蛋白表达水平.结果 MTT结果显示,淡豆豉异黄酮在1～1 000μg/L范围内促进成骨细胞增殖;RT-PCR和Western blot结果显示,1～1 000μg/L淡豆豉异黄酮上调ERβ mRNA及蛋白表达水平.而1000μg/L淡豆豉异黄酮的上述作用能够被雌激素受体拮抗剂所拮抗.结论 淡豆豉异黄酮能够促进大鼠成骨细胞的增殖,此作用可能是通过雌激素受体ERβ途径实现的.
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淡豆豉异黄酮通过影响Sox2对C3H10T1/2细胞增殖和分化的影响
目的 探讨淡豆豉异黄酮通过影响Sox2对C3H10T1/2细胞增殖和分化的影响.方法 选取间充质干细胞株C3H10T1/2为研究对象,不同浓度淡豆豉异黄酮(0、10、100、1 000 μg/L)处理C3H10T1/2细胞,并同步联合成骨诱导液诱导成骨细胞分化,采用四甲基偶氮唑蓝(MTF)实验检测C3H10T1/2细胞增殖情况,采用碱性磷酸酶(ALP)活性实验鉴定C3H10T1/2细胞成骨分化情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法及蛋白印迹法检测C3H10T1/2细胞中Sox2 mRNA及蛋白表达情况.构建pEGFP-N1-Sox2过表达载体,利用脂质体2000向C3H10T1/2细胞转染重组质粒,分析Sox2过表达对C3H10T1/2细胞增殖和成骨分化的影响.结果 MTT检测结果可见,10、100、1 000μg/L淡豆豉异黄酮可明显抑制C3H10T1/2细胞增殖,且呈现一定时间、剂量依赖性(P＜0.05);10、100、1 000 μg/L淡豆豉异黄酮可明显促进C3H10T1/2细胞成骨分化,且呈一定剂量依赖性(P＜0.05);10、100、1 000 μg/L淡豆豉异黄酮可明显抑制C3H10T1/2细胞中Sox2 mRNA及蛋白表达,且呈一定剂量依赖性(P＜0.05);Sox2过表达可明显促进C3H10T1/2细胞增殖,抑制成骨细胞分化.结论 淡豆豉异黄酮可能是通过下调Sox2表达,发挥抑制C3H10T1/2细胞增殖,促进成骨细胞分化作用.
关键词： 淡豆豉异黄酮 C3H10t1/2细胞 成骨分化 SOX2 -
淡豆豉异黄酮对AngⅡ诱导大鼠血管平滑肌细胞周期的影响
目的:观察淡豆豉异黄酮对血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ,AngⅡ）诱导大鼠血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cell,VSMC)细胞周期的影响,探讨其抑制增殖的可能机制.方法:原代培养大鼠VSMC,建立AngⅡ诱导VSMC增殖模型,MTT法观察淡豆豉异黄酮对AngⅡ诱导VSMC增殖的干预作用,流式细胞仪观察淡豆豉异黄酮干预细胞后细胞周期的变化.结果:淡豆豉异黄酮50 μg/L预孵育12、24h,100 μg/L预孵育1、4、12、24h,200 μg/L预孵育1、4、24h,500 μg/L预孵育4h可显著抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖；50、100、200 μg/L作用24h抑制增殖作用为明显,并可显著增加VSMC G0/G1期比例,降低S期比例.结论:淡豆豉异黄酮抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖作用机制可能与阻止细胞由G0/G1期进入S期,进行VSMC细胞周期的调控有关.
