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参苓白术散通过ERK/p38 MAPK信号通路干预溃疡性结肠炎大鼠结肠组织AQP3、AQP4的表达
目的 探讨细胞外信号调节激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(ERK/p38MAPK)信号通路在参苓白术散调控脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)3、AQP4表达中的作用.方法 将60只Wistar大鼠按照随机数字表均分为正常组、模型组(氯化钠注射液)、参苓白术散组、U0126+参苓白术散组、SB203580+参苓白术散组.除正常组外,脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸/乙醇灌肠,结合环境与饮食干预复制.14 d后采用蛋白质印迹法检测各组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测其mRNA表达情况.结果 模型组大鼠AQP3、AQP4蛋白表达及其mRNA的表达水平明显低于正常组(P＜0.05),参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组明显升高,组间比较有显著性差异(P＜0.05),SB203580+参苓白术散组及U0126+参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组有较小幅度升高,与正常组和参苓白术散组相比均有显著性差异(P＜0.05).结论 参苓白术散可显著改善大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达,ERK/p38 MAPK信号通路参与了参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织AQP3、AQP4表达的调节作用.
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间充质干细胞鞘内移植对脊髓缺血/再灌注损伤大鼠脊髓pERK1/2表达及神经功能的影响
目的 探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)鞘内移植对脊髓缺血/再灌注损伤大鼠脊髓细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases 1/2,ERK1/2)及神经功能的影响.方法 50只SD大鼠制备脊髓缺血/再灌注损伤(spinal cord ischemia/reperfusion injury,SCII)模型,按随机数字表法分为5组(每组10只):con组,只做SCII;PBS组,SCII后鞘内注射等容量磷酸缓冲液;MSC组,SCII后鞘内注射MSC;U0126+MSC组,SCII后静脉注射1 ml 1,4-二氨基-2,3-二氰基-1,4-双(邻氨基苯巯基)丁二烯[1,4-diamino-2,3-dicyano-1,4-bis(2-aminophenylthio)-butadiene,U0126](200μg/kg),同时鞘内注射MSC;二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)+MSC组,SCII后静脉注射1 ml DMSO,同时鞘内注射MSC.MSC鞘内移植后第2天运用比索比蒂布雷斯纳汉下肢运动功能评分法(Basso,Beattie&Bresnahan locomotor rating scale,BBB)和下肢体感诱发电位(somatosensory evoked potential,SSEP)监测大鼠脊髓神经功能,采用免疫组织化学方法观察大鼠脊髓磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(phosphorylate extracellular signal-regulated kinases 1/2,pERK1/2)神经元数目,同时采用Western blot技术检测脊髓pERK1/2蛋白含量.结果 鞘内移植MSCs后第2天,与con组比较,MSC组SCII大鼠脊髓pERK1/2神经元数目增加(P<0.05),脊髓pERK1/2蛋白含量也增加(P<0.05);下肢运动功能评分有所增加(P<0.05),SSEP潜伏期缩短(P<0.05),波幅增加(P<0.05);而用ERK1/2特异性抑制剂U0126阻断ERK1/2磷酸化后,SCII大鼠脊髓神经功能有所改善(P<0.05),但是不如MSC组改善明显.结论 MSC鞘内移植可以通过增加脊髓pERK1/2表达,促进SCII大鼠神经功能修复.
