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STAT3/iNOS信号对喉癌Hep-2细胞的增殖作用
目的 观察信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)/诱导型一氧化氮合酶(iNOS)信号通路对喉癌Hep-2细胞(Hep-2)的增殖作用,并探讨其作用机制.方法 体外培养Hep-2细胞,STAT3慢病毒(2μL,1×1010病毒颗粒)和同剂量siRNA STAT3转染Hep-2细胞6d后,细胞分为对照组、siRNA STAT3组和STAT3组.MTT法检测各组Hep-2细胞增殖情况.实时荧光定量PCR检测检测各组细胞STAT3、iNOS及血管内皮因子C(VEGF-C) mRNA相对表达.结果 镜下观察STAT3组Hep-2细胞数量显著高于对照组和siRNA STAT3组,MTT法显示STAT3组Hep-2细胞在6d增殖显著高于对照组和siRNA STAT3组(P＜0.05),实时荧光定量PCR结果表明STAT3转染组STAT3、iNOS和VEGF-C mRNA表达显著高于对照组和siRNA STAT3组(P＜0.05),而对照组和siRNA STAT3组STAT3、iNOS和VEGF-C蛋白表达未见显著差异(P＞0.05).STAT3与iNOS及VEGF-C mRNA表达显著正相关(P＜0.05).结论 STAT3/iNOS信号通路能够通过上调VEGF-C表达促进喉癌Hep-2细胞增殖,STAT3/iNOS信号通路可成为治疗喉癌新的靶点.
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胶质瘤细胞中IL-1RAP的作用及其与STAT3的关系
目的 研究白介素1受体辅助蛋白(IL-1 RAP)在胶质瘤中的作用及其与转录活化因子3(STAT3)的关系.方法 构建IL-1RAP表达载体,转染胶质瘤细胞系U251,利用流式±细胞仪检测转染IL-1RAP对U251细胞周期及凋亡影响.利用免疫共沉淀钓取STAT3,检测转染IL-1RAP后STAT3的表达情况,并利用免疫荧光方法检测IL-1RAP与STAT3的共定位情况.结果 IL-1RAP蛋白定位于胶质瘤细胞核.与转染空质粒对照组相比,IL-1RAP有明显的促进肿瘤细胞凋亡[(52.10-5.51)％ vs.(7.57士0.54)％,P＜ 0.05]和周期阻滞作用[(68.22士1.96)％ vs.(38.31±7.22)％,P＜0.05].通过免疫共沉淀和共定位证实IL-1RAP和STAT3可以相互作用.结论 IL-1RAP有抑制胶质瘤细胞增殖、促进细胞凋亡的作用.IL-1RAP可能通过与STAT3相互作用进入细胞核发挥促进细胞凋亡和抑制细胞周期的作用.
关键词： 白介素1受体辅助蛋白 转录活化因子3 胶质瘤 细胞周期 凋亡 -
STAT3在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用
目的 探讨转录活化因子3 (STAT3)在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 将健康成年雄性SD大鼠18只分为3组(n=6):假手术组(S组),只分离左冠状动脉,不结扎;缺血/再灌注组(I/R组),结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min;缺血/再灌注+STAT3抑制剂Stattic组(ST组),于再灌注前10 min经尾静脉注射STAT3特异性抑制剂Stattic 500μg/kg.再灌注结束时,取缺血区心肌标本,采用红四唑(TTC)染色检测心肌梗死面积;采用原位末端缺口标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡指数;采用Western-blot检测磷酸化STAT3(p-STAT3)、Fas蛋白表达;采用RT-PCR检测p-STAT3、Fas的mRNA表达;采用免疫组织化学法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (Caspase-3)表达.结果 与S组相比,I/R组心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数、p-STAT3和Fas的蛋白及其mRNA表达、Caspase-3表达水平均增高(P＜0.05);与I/R组比较,ST组心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数升高(P＜0.05),p-STAT3蛋白及mRNA表达水平下调,Fas蛋白及mRNA表达、Caspase-3表达水平增加(P＜0.05).结论 STAT3可能通过调控Fas系统,从而有效的抑制Caspase-3凋亡系统对心肌细胞及箕其他组织的损伤.
关键词： 心肌缺血 再灌注损伤 转录活化因子3 Fas 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 -
阿柏西普对大鼠视网膜Müller细胞STAT3表达的影响
目的:探讨阿柏西普对大鼠视网膜Müller细胞信号转导及转录活化因子3(STAT3)表达的影响.方法:采用不同浓度的阿柏西普100μL(加药浓度分别为400、200、100pg/mL)大鼠永生化视网膜Müller细胞24、48h后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室法检测细胞侵袭,Western-blot法检测AKT、STAT3蛋白表达.结果:随着阿柏西普浓度的升高,Müller细胞的增殖活性下降(P<0.05).处理48h后,随着阿柏西普浓度的升高,Müller细胞的凋亡率逐渐上升,Müller细胞的侵袭穿透指数逐渐降低(P<0.05).转染48h后,随着阿柏西普浓度的升高,Müller细胞的AKT蛋白相对表达量无显著变化(P>0.05),STAT3蛋白相对表达量逐渐降低(P<0.05).结论:阿柏西普可抑制大鼠视网膜Müller细胞STAT3蛋白表达,从而抑制细胞增殖与侵袭性,促进细胞凋亡.
