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  • 9V型肺炎球菌多糖蛋白结合物原液中游离多糖含量检测方法的建立

    作者:胡小华;唐爽;王海伟;马义静;杜琳;朱卫华

    目的 建立测定9V型肺炎球菌多糖蛋白结合物原液中游离多糖含量的检测方法.方法 对9V型肺炎球菌多糖溶液进行不同浓度的脱氧胆酸钠(NaDOC)酸沉处理,选择仅沉淀结合物而不沉淀多糖的佳处理条件,筛选出所能沉淀蛋白的大浓度;对建立的方法进行准确度、精密度、专属性及线性验证.结果 9V型肺炎球菌多糖蛋白结合物原液的佳NaDOC酸沉处理条件为2% NaDOC-0.05 mol/L HCl;蛋白浓度低于200 μg/mL时,NaDOC酸沉处理条件沉淀蛋白的效果佳.准确度试验的回收率在90%~99%之间;实验内及实验间均具有良好的精密度(CV均小于10%);在10~100 μg/mL范围内采用葸酮硫酸法测定糖浓度的曲线,线性良好,r2>0.998;NaDOC的终浓度在0.25%以下,对蒽酮硫酸法检测无干扰.结论 NaDOC酸沉淀法能很好地分离结合物原液中的结合物与游离多糖,具有良好的重复性和准确性,可用于测定9V型肺炎球菌多糖蛋白结合物原液中的游离多糖含量.

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