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ERK1/2抑制对沙门菌侵袭小鼠胃癌细胞后小鼠β-防御素-2表达的影响
目的 探讨ERK1/2抑制对沙门菌侵袭小鼠胃癌(mouse forestomach carcinoma,MFC)细胞后小鼠β-防御素-2(mouseβ-defensin-2,mBD-2)表达的影响及作用机制.方法 采用RNA干扰的方法抑制MFC细胞中ERK1/2的表达,并经G418筛选稳定细胞株,经RT-PCR和Western blot法检测ERK1/2基因的抑制效率.用103个/ml的沙门菌对干扰组及对照组(未转染)的MFC细胞分别作用4、8及12 h,通过Western blot法检测mBD-2蛋白表达及Rsk90的磷酸化水平.同时采用MTT法检测沙门菌作用两组MFC细胞12、24及48 h时的生长情况.结果 RT-PCR和Western blot法检测结果表明,ERK1/2基因抑制效果显著.沙门菌作用MFC细胞后4、8和12h后,各时间点间干扰组细胞中mBD-2蛋白表达及Rsk90蛋白磷酸化水平差异无统计学意义(P＞0.05),且均显著低于各时间点的对照组(P＜0.05).沙门菌作用12和24 h,干扰组细胞的抑制率明显高于对照组(P＜0.05),作用48 h时,两组细胞的抑制率差异无统计学意义(P＞0.05),细胞几乎全部死亡,且干扰组细胞抑制率的增加速度较快,作用24 h时已达97.7％.结论 ERK1/2抑制可明显降低沙门菌侵袭MFC后mBD-2的表达水平,表明ERK1/2可调控mBD-2的表达.
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褪黑素的抗胃癌效应及其引起的Bcl-2、Bax、p21和p53的表达变化
为了探讨褪黑素体内抗小鼠胃癌作用及其机制,本研究应用小鼠胃癌(murine foregastric carcinoma,MFC)细胞建立荷胃癌小鼠模型,不同浓度褪黑素干预后,运用实时荧光定量RT-PCR、免疫印迹等方法检测Bcl-2,Bax,p21,p53的表达变化.结果显示:(1)褪黑素能够缩小荷胃癌小鼠的肿瘤体积,减轻肿瘤重量,达到抗胃癌作用;(2)褪黑素在抑制胃癌生长过程中下调肿瘤组织Bcl-2表达,上调Bax、p21和p53表达.以上结果表明,褪黑素可通过促进胃癌细胞凋亡从而实现体内抑制胃癌生长作用.
