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人TRAIL文献资料
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人TRAIL细胞外段基因在大肠杆菌中的表达及其包涵体的复性
目的在大肠杆菌中表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段(sTRAIL)基因,并研究其包涵体的复性.方法应用RT-PCR法从正常人外周血单核细胞中获得sTRAIL的编码基因,将其克隆到原核表达载体pBV220,于大肠杆菌DH5α中通过温控诱导表达;将包涵体进行变性和复性处理后,采用离子交换层析纯化表达产物,并经Dot blot及MIT试验鉴定.结果通过温度诱导,目的基因主要以包涵体形式高效表达,包涵体蛋白经梯度透析法复性可获得具有抗肿瘤活性的重组人sTRAIL.结论已获得大量纯化重组人sTRAIL,为开发新型抗肿瘤制剂奠定基础.
