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转印文献资料
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电泳凝胶与转膜的原位切割方法
目的:建立简易的快速分离高活性纯度酶以及用于氨基酸测序的转膜方法.方法:以考马斯亮蓝R-250的磺基水杨酸水基染色液,确定聚丙烯酰胺凝胶与转印到PVDF膜的蛋白电泳带的位置,以等位切割方法获得未受染色液污染的高纯度的活性酶组分以及转印的PVDF膜.结果:以适当浓度的考马斯亮蓝R-250的磺基水杨酸水基染色液染色,能保证聚丙烯酰胺凝胶和PVDF膜在染色前后保持等长.结论:等位切割方法能避免目前常见的如SDS、染色液组分对酶活性以及测序结果造成的干扰.
关键词： 电泳 聚丙烯酰胺凝胶/方法 转印 原位切割 -
蛋白印迹技术研究进展
蛋白印迹技术[1](western blotting)是继DNA印迹(southern blotting)和RNA印迹(northern blotting)之后发展起来的,集电泳、转印和免疫标记为一体的一项蛋白质分离检测技术.本文就此项技术近年来在转印、免疫检测等方面所取得的进展作一概述.
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蛋白印迹技术的优化
蛋白印迹是细胞和分子生物学研究中重要的一种实验技术。利用蛋白印迹技术可以检测细胞或组织裂解液中的特异性蛋白，特别是微量蛋白的检测，并进行定性及定量的分析。自1979年科学家发明了将蛋白质通过凝胶电泳移植到生物膜后，蛋白印迹技术得到了极大的发展，目前科学界有各种形式的印迹方法。我们就如何优化蛋白印迹提高成功率做一介绍。
