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WT1和VEGF在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨肾母细胞瘤基因(WT1)和血管内皮生长因子(VEGF)在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义.方法 经手术切除的50例原发性上皮性卵巢癌组织标本,另选取同期获得的20例良性卵巢肿瘤组织标本和20例正常卵巢组织标本.采用免疫组化SP法对所有组织标本中的WT1和VEGF表达情况进行测定,并结合患者的病理资料进行综合分析.结果 卵巢癌、良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织WT1阳性率分别为66.0%、10.0%和5.0%,VEGF阳性率分别为74.0%、30.0%和15.0%.WT1和VEGF均在卵巢癌组织中阳性表达高(P<0.05);卵巢癌组织中WT1的表达与病理分期、病理分级和病理类型有关(P<0.05),与年龄和淋巴转移无关(P>0.05);VEGF的表达则与病理分期有关(P<0.05),与年龄、病理分级、病理类型和淋巴转移均无关(P>0.05);卵巢癌组织中WT1与VEGF的阳性表达呈正相关(r=0.728,P<0.05).结论 WT1和VEGF均在上皮性卵巢癌的发生发展和侵袭中起到了重要作用,且两者表达呈正相关,可作为卵巢癌诊断、预后判断的重要指标.
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WT1和VEGF-C在上皮性卵巢癌中的表达及意义
目的:探讨肾母细胞瘤基因(Wilm's tumor gene,WT1)与血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)蛋白在上皮性卵巢癌中的表达、临床意义及二者的相关性.方法:采用免疫组织化学SP法检测50例卵巢上皮性癌、10例卵巢良性肿瘤和10例正常卵巢石蜡标本中WT1、VEGF-C的表达情况.结果:上皮性卵巢癌与卵巢良性肿瘤、正常卵巢组织相比,WT1和VEGF-C阳性表达率都增加,差异有统计学意义(χ2＝9.818,P＜ 0.01;χ2＝7.061,P＜0.01).WT1阳性表达与上皮性卵巢癌的病理分级及FIGO分期相关(P＜0.05),与病理类型呈极显著相关(P＜0.001),而与年龄及淋巴结转移无关(P＞0.05).VEGF-C阳性表达与上皮性卵巢癌FIGO分期相关(P＜0.05),与淋巴结转移呈极显著相关(P＜0.001),与年龄、病理类型、病理分级无关(P＞0.05).在上皮性卵巢癌中,WT1和VEGF-C阳性表达呈正相关(γ＝0.342,P＜0.05).结论: WT1在不同亚型上皮性卵巢癌中表达不同.WT1异常高表达可能是诊断卵巢癌的分子标志物.WT1和VEGF-C在卵巢癌的浸润转移中起促进作用,两者共同参与上皮性卵巢癌的发生、发展.
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T-载体在聚合酶链反应扩增产物克隆中的应用
目的探讨克隆聚合酶链反应(PCR)扩增产物的简便方法.方法用PCR方法分别特异性扩增Wilms瘤基因wt1和尿激酶受体(UPAR)基因,并利用Taq聚合酶具有的延伸酶活性将扩增产物直接克隆入T-载体,EcoRⅠ酶切鉴定阳性重组子.结果设计的引物可分别扩增wt1基因锌指区(343bp)和UPAR基因编码区全长(1083bp);未经修饰的常规PCR和高保真PCR扩增产物可被直接克隆入pGEM-T Easy载体,其中正确重组率为62.5%～87.5%;克隆的wt1基因和UPAR基因已被成功用于竞争性PCR或表达.结论 T-载体法是克隆PCR产物通用而有效的方法.
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急性髓系白血病患者hDMP1表达特点及临床意义
目的 探讨人类细胞周期调节蛋白依赖性Myb样蛋白1(hDMP1)在急性髓系白血病( AML)中的表达及其临床意义.方法 93例初诊AML患者及19例健康志愿者(对照组)骨髓标本,以β胆色原脱氢酶(GAPDH)表达水平为内参,应用实时定量RT-PCR方法检测hDMP1及肾母细胞瘤基因(WT1)的表达水平.分析hDMP1表达水平与患者临床资料、染色体核型的关系.结果 AML患者骨髓细胞中hDMP1在表达水平较对照组显著降低(476.6 vs.2103.0)(P＜0.01),WT1基因表达水平较对照组显著升高(202.6 vs.1.2)(P＜0.01).hDMP1和WT1基因表达水平与患者性别、年龄、有无肝脾淋巴结肿大、起病时外周血WBC计数、骨髓中原始细胞比例、AML亚型、染色体核型分组无关.结论 AML患者hDMP1的低表达伴随WT1基因高表达,两者均参与AML发病.
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地高辛掺入RT-PCR半定量检测WT1基因在AML中的表达及其意义
目的建立客观的半定量检测WT1基因表达的方法,探讨WT1基因表达水平与急性髓细胞性白血病(AML)预后的关系.方法用地高辛标记的脱氧三磷酸尿苷(DIG-11-dUTP)掺入逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测,用KG-1细胞建立WT1表达的半定量稀释曲线,分析53例AML及21例非恶性疾患病人骨髓中WT1基因的表达.结果倍比稀释的KG-1细胞WT1基因表达水平与稀释倍数有良好的线性关系;将WT1基因与β-actin基因的表达水平之比＜0.16定为(-),≥0.16～＜0.6为(+),≥0.6～＜1.0为(),≥1.0为().21例非恶性疾患病人骨髓中WT1基因均为阴性,41例初治AML病人WT1基因表达阳性率为92.7%,随着WT1基因表达水平的升高,完全缓解(CR)率有明显下降的趋势(＜0.6及≥0.6组比较P＜0.025).CR后WT1基因表达水平明显下降,复发后又显著升高.结论 DIG掺入RT-PCR半定量检测WT1基因表达的方法客观、准确,WT1基因表达水平与AML的预后相关.
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WT1在上皮性卵巢癌中的表达及意义
目的:探讨肾母细胞瘤基因(Wilms tumor gene,WT1)蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测50例卵巢上皮性癌、10例卵巢良性肿瘤和10例正常卵巢石蜡标本中WT1表达情况.应用SPSS13.0软件结合临床病理资料进行综合分析.结果:正常及良恶性上皮性卵巢组织中WT1皆有表达,WT1在卵巢癌组织中的表达明显高于正常及良性卵巢组织(P＜0.01),正常和良性卵巢组织中两者无显著性差异(P＞0.05).WT1在浆液性卵巢癌中表达率为93%(28/30),随着病理分级及临床分期的增高,WT1表达率逐渐增高.WT1阴性表达者生存时间明显比WT1阳性者长.WT1表达与病理分级、临床分期、组织学类型及预后明显相关(P＜0.05),而与年龄、淋巴结转移无关(P＞0.05).结论:WT1在卵巢癌组织中的表达明显高于正常及良性卵巢组织,在卵巢癌的浸润和转移中发挥了重要作用,可作为判断卵巢癌恶性程度及评估不良预后的重要指标.
