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PTPMeg2的PTP结构域对磷酸化STAT3入核的抑制作用
目的:探讨PTPMeg2结构域对磷酸化STAT3核转位的影响。方法采用免疫共沉淀技术研究PTPMeg2与STAT3不同结构域的相互作用,采用GST pull down实验研究STAT3与PTPMeg2不同结构域的相互作用,用激光共聚焦显微镜直接观察PTPMeg2对磷酸化STAT3细胞定位的影响。结果 STAT3与PTPMeg2的所有结构域均有相互作用,PTPMeg2的PTP结构域和△SEC结构域( PTP结构域+LK结构域)可以抑制磷酸化STAT3入核。结论 PTPMeg2的PTP结构域对磷酸化STAT3的入核具有抑制作用。
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PTPMeg2对胰腺癌细胞STAT3转录活性的抑制作用
目的 探索磷酸酶PTPMeg2对胰腺癌细胞capan2的STAT3转录活性的影响.方法 将胰腺癌细胞capan2转染STAT3的报告质粒luc-APRE,STAT1的报告质粒luc-M67,同时转染内参照.转染24h后用IL6激活STAT3,检测是否存在PTPMeg2时的荧光素酶值,利用荧光素酶的相对比活性代表转录活性的高低.结果 PTPMeg2对STAT3转录活性的抑制作用比对照组减低2倍,在IL6激活STAT3的情况下,PTPMeg2对STAT3的转录活性的抑制作用比对照组减低4.5倍以上.而PTPMeg2对STAT1的转录活性则没有影响.结论 PTPMeg2对胰腺癌细胞capan2中STAT3的转录活性具有一定的抑制作用.
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PTPMeg2抑制NIH3 T3/STAT3 CA细胞模型STAT3转录活性的研究
目的:探讨磷酸酶 PTPMeg2对 NIH3T3/STAT3CA细胞模型的增殖及 STAT3转录活性的影响。方法构建STAT3异常突变的细胞模型 NIH3T3/STAT3CA,MTT法和裸鼠异体移植瘤实验分别用于观察 PTPMeg2对 NIH3T3/STAT3CA细胞体外和体内增殖的影响,免疫共沉淀实验用于PTPMeg2与STAT3CA相互作用的研究,双荧光素酶报告基因法用于转录活性的研究。结果 PTPMeg2对NIH3T3/STAT3CA细胞在体外和体内都具有增殖抑制作用,与对照组比较均具有明显的统计学意义。 PTPMeg2对 NIH3T3/STAT3CA细胞的转录活性具有抑制作用,而PTPMeg2的突变体( PTPMeg2C515S)和 ShPTPMeg2则无效。结论 PT-PMeg2对NIH3T3/STAT3CA细胞具有增殖抑制作用,其作用机制可能与抑制STAT3的转录活性有关。