首页 > 文献资料
-
无机砷对Chang肝细胞核转录因子Nrf2及其下游抗氧化酶mRNA表达的影响
目的 观察亚砷酸钠(NaAsO2)对Chang肝细胞株核转录因子Nrf2及Nrf2调控的下游抗氧化酶醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素单加氧酶-1(HO-1)mRNA表达的影响.方法 分别以不同浓度NaAsO2(5、10、25和50μmol/L)染毒人类Chang肝细胞株6h,采用RT-PCR法测定Nrf2、NQO1和HO-1的mRNA表达水平.结果 5、10、25和50μmol/L NaAsO2暴露6h,Nrf2的mRNA表达分别为对照组的(100.74±3.70)%、(105.96±1.75)%、(101.76±1.01)%和(101.81±6.33)%,与对照组比较,差异未见统计学意义(P＞0.05);各暴露组NQO1的mRNA表达均较对照组相比显著增加(P＜0.05),分别为对照组的(106.52±3.11)%、(113.27±2.84)%、(111.96±6.96)%和(107.33±2.76)%;NaAsO2暴露还能够显著诱导HO-1的mRNA表达增强,且具有剂量-效应关系,差异具有统计学意义(P＜0.01).5、10、25和50μmol/L NaAsO2暴露,HO-1的mRNA表达分别为对照组的(186.92±1.75)%、(194.08±2.75)%、(196.93±2.55)%和(200.02±0.83)%.结论 无机砷暴露未显著增强Chang肝细胞核转录因子Nrf2的转录,却能够显著提高Nrf2调控的下游抗氧化酶NQO1和HO-1的mRNA表达水平.
-
亚砷酸钠对核转录因子Nrf2和血红素单加氧酶-1表达的影响
目的 观察亚砷酸钠(NaAsO_2,sodium arsenite)对Chang肝细胞核转录因子Nrf2(transcription factor NF-E2-related factor2)及血红素单加氧酶-1(heineoxygenase 1,HO-1)蛋白表达的影响,并应用谷胱甘肽(GSH)合成抑制剂丁硫氨酸亚矾胺(buthionine sulfoximine,BSO)探讨NaAsO_2诱导Nrf2和HO-1蛋白活化的可能机制.方法 不同浓度NaAsO_2(5、10、20 μmol/L)单独作用Chang肝细胞24 h;同时将Chang肝细胞用BSO(3 mmol/L)预处理12 h后,再用NaAsO_2(5、10、20μmol/L)作用24 h.以Western Blot法检测细胞Nrf2和HO-1的蛋白表达.结果 5、10和20 μmoI/L NaAsO_2单独作用显著提高细胞Nrf2和HO-1蛋白含量;BSO预处理组细胞Nrf2和HO-1的蛋白表达则更显著高于NaAsO_2单独作用组(P<0.01).结论 无机砷能够诱导细胞Nrf2和HO-1蛋白活化;细胞内巯基可能对无机砷诱导的Nrf2和HO-1蛋白活化具有重要作用.
-
无机砷对Chang liver细胞血红素单加氧酶-1表达的活化作用
目的 观察无机砷(NaAsO2)对正常人肝细胞株Changliver细胞血红素单加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达的活化作用.方法 采用细胞培养的方法,将Chang liver细胞分别暴露于10 μmol/L NaAsO2后0(对照)、2、6、12、24 h和0(对照)、5、10、25、50 μmol/L后12 h,收集细胞,Western blot技术检测细胞内HO-1蛋白的表达.结果 Chang liver细胞染砷10 μmol/L.体外培养6、12、24 h,细胞内HO-1蛋白表达(3.97±0.72、12.92±2.98、23.29±3.82)明显高于对照组(1.00±0.00).组问比较和各组分别与对照组比较.差异有统计学意义(F=85.83,P＜0.01;t值分别为-9.42、-8.95、-13.83,P＜0.05或＜0.01).染砷5、10、25、50 μmo]/L.体外培养12 h,细胞内HO-1蛋白表达(6.34±0.25、7.75±0.39、7.93±0.14、12.48±-0.35)明显高于对照组(1.00±0.00),组间比较和各组分别与对照组比较,差异有统计学意义(F=709.66,P＜0.01;t值分别为-36.25、-30.19、-86.40、-56.40,P＜0.01).结论 无机砷能够诱导Chang Liver细胞内HO-1的活化,促进蛋白表达,并且具有时间和剂量效应.
关键词： 亚砷酸钠 血红素单加氧酶-1 Changliver细胞 -
无机砷对Chang肝细胞株血红素单加氧酶-1mRNA和蛋白表达的诱导作用
[目的]观察亚砷酸钠(sodium arsenite,NaAsO2)对Chang肝细胞株血红素单加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)mRNA和蛋白表达的诱导作用.[方法]以5μmol/L和10μmol/L的NaAsO2作用Chang肝细胞株2、6、12h和24h,分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot法检测细胞内HO-1的mRNA和蛋白表达情况.[结果]5μmol/L和10μmol/L NaAsO2暴露2h开始出现HO-1 mRNA的诱导表达;6h的表达水平明显高于对照组和2h暴露组(P<0.01).其中,10gmol/LNaAsO2暴露12h和24h的mRNA表达均明显高于该浓度的6h暴露组(P<0.01);但24h的HO-1 mRNA表达水平与12h组相比没有明显升高.NaAsO2暴露诱导的HO-1蛋白表达则从6h开始出现,12h组明显高于6h组,24h组明显高于12h组(均P<0.01);5μmol/L和10μmol/L NaAsO2分别暴露6、12h和24h的HO-1蛋白表达量分别是对照组的2.80、9.34、18.15和3.97、12.92、23.29倍;此外,10μmol/L NaAsO2暴露12h和24h的HO-1 mRNA和蛋白表达均明显高于对应时间的5μmol/L组(P<0.01).[结论]NaAsO2暴露能够有效和持续性诱导Chang肝细胞株HO-1的mRNA和蛋白表达,是无机砷暴露的一种细胞保护性适应性反应.
