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最佳反应体系文献资料
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表没食子儿茶素没食子酸酯体外α-葡萄糖苷酶活性的影响
目的 研究酵母和大鼠小肠黏膜来源的α-葡萄糖苷酶活性测定的体外体系,评价在该体系条件下表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的α-葡萄糖苷酶抑制活性(AGI)的活性,为建立AGI活性评价体系提供依据.方法 分别应用酵母和大鼠小肠黏膜提取液作为α-葡萄糖苷酶,以麦芽糖为底物;用0.00、0.25、0.50、1.0和1.50mg/ml的酶与0.00、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1和0.12mol/l的底物反应,采用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖生成量来确定反应条件;在该反应条件下比较两种酶源的活性差异,并以此分析EGCG的AGI作用和计算半数抑制浓度(IC50).结果 佳反应条件为0.50mg/ml的酶与0.06mol/l的底物反应,研究发现在该体系下EGCG对酵母来源的AGI活性强于小肠黏膜来源的酶,其IC50值分别为:0.150和0.837ms/ml.结论 建立体外AGI活性评价体系有利于准确筛选AGI活性物质,酵母来源的酶可用于AGI活性的初步筛选;离体组织测定法可用于进一步评价AGI活性物质;EGCG体外具有较强的AGI活性.
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 最佳反应体系 降糖机制 α-葡萄糖苷酶 -
何首乌ISSR-PCR实验反应体系的建立和优化
探讨了何首乌ISSR实验中的各种影响因素,采用正交设计L16(45)对PCR反应中5个因素(Taq酶,Mg2+,dNTP,模板DNA和引物)在4个水平上进行优化试验.在初步实验的基础上,通过因素内比较进一步优化各因素在ISSR-PCR反应中的浓度;设置了不同的退火温度,建立了何首乌ISSR的佳反应体系,为进一步进行何首乌种群间遗传多样性的研究奠定基础.
