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以纳米颗粒为载体转染基因的发展概况
目的综述以纳米颗粒作为基因载体进行基因治疗的发展概况.方法依据国内外刊物公开发表的文献,对有关以纳米颗粒作为基因递送载体进行基因治疗的研究进行分类、归纳与整理.结果纳米颗粒转运系统能够保护被转运的基因,有较高的转染效率,具有良好的靶向性,并且提高了药物的生物利用度,显示出一定的缓控释作用.结论纳米颗粒作为基因递送载体具有广阔的发展前景.
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壳聚糖纳米颗粒对K562细胞增殖的影响
目的 评价壳聚糖纳米颗粒对K562细胞增殖的影响,并探讨相关机制.方法 采用MTT法对壳聚糖纳米颗粒的佳作用时间和作用浓度进行筛选,免疫荧光技术和透射电镜技术考察壳聚糖纳米颗粒对K562细胞形态的影响,流式细胞仪检测壳聚糖纳米颗粒对线粒体膜电位、细胞内ROS含量和Ca2+浓度的影响.结果 壳聚糖纳米颗粒(15 μg·mL-1)可以明显诱导K562细胞出现凋亡改变,表现为:细胞核变小,出现核聚缩等现象.同时线粒体膜电位崩解,ROS含量增加,Ca2+浓度增加.结论 壳聚糖纳米颗粒对K562细胞的增殖有抑制作用,其机制可能与诱导细胞凋亡有关.
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PcDNA3.1-GBD-壳聚糖纳米颗粒经鼻免疫小鼠的实验研究
目的:检测 PcDAN3.1-GBD-壳聚糖纳米颗粒经鼻免疫小鼠的效果.方法:制备两种PcDAN3.1-GBD-壳聚糖纳米颗粒载体系统,经鼻黏膜免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测血清中针对葡聚糖结合蛋白A(GBD)的特异IgG抗体滴度及唾液中针对葡聚糖结合蛋白A(GBD)的特IgA抗体滴度.与阳性对照组霍乱毒素-PPcDAN3.1-GBD及未免疫组、空白壳聚糖纳米颗粒组作比较.结果:该载体系统经鼻免疫小鼠所产生的血清及唾液中针对GBD的IgG和IgA抗体滴度远大于未免疫组和空白壳聚糖纳米颗粒组,而与阳性对照组霍乱毒素-PcDAN3.1-GBD组抗体滴度相当.且维持的抗体滴度更稳定和持久.结论:壳聚糖纳米颗粒系统可作为经鼻运输基因防龋疫苗的载体系统.
关键词： PcDAN3.1-GBD 壳聚糖纳米颗粒 ELISSSA 免疫 非病毒基因运输 -
壳聚糖纳米颗粒包裹对鼠白细胞介素2基因表达和调节小鼠免疫效应的影响
本实验制备壳聚糖纳米颗粒(CNP),包裹小鼠白细胞介素2基因(mIL-2)真核表达质粒(VRMIL-2),肌注接种21 d昆明小鼠,观察mIL-2基因体内表达及其对免疫应答和免疫保护的影响.实验结果发现:CNP包裹VRMIL-2注射小鼠血液中IgG、IgM和IgA不同程度地增多,均显著高于CNP包裹空白质粒组(P<0.05);其血清中IL-2、IL-4和IL-6的含量明显升高,与对照组差异显著(P<0.05);外周血液的白细胞和淋巴细胞数量也较对照组显著增加.免疫后35d以大肠杆菌口服攻毒实验小鼠,检测发现:CNP包裹VRMIL-2组小鼠的上述免疫指标除中性粒细胞外均显著多于对照小鼠,VRMIL-2接种小鼠均健康存活,而对照小鼠均发病;尽管CNP包裹VRMIL-2接种小鼠的体液和细胞免疫指标与未包裹VRMIL-2免疫鼠差异不显著(P>0.05),但剂量仅为后者的1/5.这些结果表明:壳聚糖纳米颗粒包裹VRMIL-2可显著提高外源IL-2基因体内表达水平,明显增强体液和细胞免疫水平的效应,增强对大肠杆菌的抗病力,提示壳聚糖纳米颗粒包裹IL-2基因可明显增强动物的体液和细胞免疫,可作为有效的抗感染免疫调节剂.
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葡聚糖结合蛋白A-壳聚糖纳米颗粒经鼻免疫小鼠的实验研究
目的:检测葡聚糖结合蛋白A[Glucan binding protein·A(GBPA)]-壳聚糖纳米颗粒载体系统经鼻黏膜免疫小鼠的效果.证明壳聚糖可作为经鼻用蛋白防龋疫苗的载体系统.方法:用该载体系统经鼻免疫小鼠,间接ELISA方法检测血清中针对葡聚糖结合蛋白A的特异的IgG以及唾液中针对葡聚糖结合蛋白A的特异的IgA.与霍乱毒素-(GbpA)、未免疫组、空白壳聚糖纳米颗粒组作比较.结果:产生的血清和唾液中针对GbpA的特异的IgG、IgA抗体滴度远大于未免疫组、空白壳聚糖纳米颗粒组,与霍乱毒素-(GbpA)组抗体滴度相当.结论:证明壳聚糖纳米颗粒系统可作为经鼻运输葡聚糖结合蛋白A的载体系统.
