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寡核苷酸MT01及其在牙周炎方向的研究进展
MT01是依据人线粒体DNA序列设计的单链寡核苷酸,具有免疫负调节活性.多项研究显示,MT01在抑制由病原体感染所引起的有害、过度的免疫反应以及抑制牙槽骨吸收和促进成骨细胞活化方面有着显著的效果.炎症和骨吸收是牙周疾病的本质.本文就MT01的新研究进展及其在牙周炎方向的相关研究做一综述.
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MT01抑制Pg感染小鼠单核/巨噬细胞内NLRP3mRNA的表达
目的 探讨MT01对牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染小鼠单核/巨噬细胞NLRP3 mRNA表达的影响.方法 选取小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7为目的细胞,分别与Pg、MT01、Pg+MT01、磷酸盐缓冲液(PBS)共培养6h,Real-time PCR检测NLRP3 mRNA的表达.结果 与PBS组比较,NLRP3 mRNA的表达在MT01组低(P＜0.05),Pg组高(P＜0.01),Pg+MT01组高于PBS组,但低于Pg组(P＜0.01).结论 MT01可抑制Pg感染所导致的NLRP3 mRNA的表达.
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MT01对人成骨样细胞系MG63内Toll样受体7,9表达的影响
目的 探讨人成骨样细胞系MG63(简称MG63)内Toll样受体(TLRs)的表达情况及MT01与细胞内TLRs的关联.方法 应用RT-PCR法检测MG63内TLR1～10 mRNA的表达情况;MT01与MG63作用12、24、48 h后,Real time PCR法检测MG63细胞内TLR7,9 mRNA表达的变化;Western印迹法检测MG63细胞内TLR7,9蛋白表达的变化.结果 MG63细胞表达TLR1～ 10 mRNA;一定浓度的MT01作用于细胞后,对TLR7,9 mRNA及蛋白表达有显著的抑制作用,这种抑制作用无时间依赖性.结论 MG63细胞表达TLR1-10 mRNA,一定浓度的MT01可影响MG63细胞内TLR7,9 mRNA及蛋白的表达.
关键词： MT01 人成骨样细胞系MG63 Toll样受体 -
Cy5标记寡脱氧核苷酸MT01经大鼠牙龈黏膜局部注射后在重要脏器组织中的分布
目的：观察不同时间点Cy5标记寡脱氧核苷酸（ODN）MT01在大鼠体内重要脏器组织中的分布，初步探讨其分布的规律性。方法：选取60只 Wistar大鼠随机分为实验组和对照组，每组30只；实验组大鼠牙龈黏膜局部注射Cy5标记的MT01，对照组大鼠牙龈黏膜局部注射未经标记的MT01；于注射后15 min、1 h、4 h、8h、16h、1d、2d、3d、4d和5d分别取大鼠肺、肝、脾、肾、心和脑组织；激光共聚焦显微镜下观测大鼠重要脏器组织中 MT01的荧光分布，以荧光阳性细胞率表示各脏器组织内 MT01进入各组织细胞量。结果：对照组大鼠重要脏器组织中未观察到荧光阳性细胞；实验组大鼠除心、脑组织外，肺、肝、脾和肾组织细胞中均可观察到荧光阳性细胞；肾组织中荧光阳性细胞呈片状分布，荧光主要集中于肾小管上皮细胞的胞质中；肝、脾和肾组织的荧光阳性细胞率呈规律性变化，峰值分别出现在注射后4、3和4d时，肺组织的荧光阳性细胞率未见明显规律性。结论：MT01经大鼠牙龈局部注射后可进入肺、肝、脾和肾组织，主要集中在肾脏组织中，且分布具有一定规律性。
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氯喹对MT01促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖作用的影响
目的:通过检测氯喹(chloroquine,CQ)对MT01促进Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖的影响,证实MT01可能经由内吞小体对BMSCs细胞生物学性能产生影响.方法:不同工作浓度的CQ与第3代Wistar大鼠BMSCs共培养24、48、72、96 h,检测CQ对BMSCs增殖影响的量效和时效关系;在此基础上,加入工作浓度为1 mg/L的MT01,MTT法检测不同浓度、不同时间点CQ对MT01作用下BMSCs增殖的影响.结果:适当浓度CQ(4mg/L)具有促进BMSCs增殖的作用;48 h CQ刺激BMSCs增殖明显;低浓度CQ(1 mg/L、2 mg/L)对MT01促进BMSCs增殖具有抑制作用.结论:CQ对MT01促进BMSCs增殖具有抑制作用,提示MT01可能通过进入BMSCs内吞小体中发挥作用.
