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人体角膜移植内皮排斥反应的共焦显微镜研究
目的:应用共焦显微镜探讨活体角膜内皮排斥反应的早期形态学特征和变化.方法:19例(19只眼)角膜移植术后发生内皮排斥反应的人群根据角膜内皮排斥反应轻重的不同分为轻、中、重三组.应用共焦显微镜(Confoscan2.0)对角膜植片进行检查,并分析其相关因素.结果:活体角膜内皮排斥反应特有的共焦显微镜改变主要包括:①早期发现在KP及其附近的内皮细胞面有少量的免疫细胞附着,紧靠KP处的角膜基质细胞出现轻度水肿,细胞排列较混乱,胞浆中出现少量空泡状暗区.②中期发现在内皮细胞表面可见较多的免疫细胞聚集并被完全激活,基质细胞明显水肿,细胞核不清楚,基质中有免疫细胞进入;可见由高反光的免疫细胞和不明成份的组织碎片混合组成内皮排斥线.③在晚期排斥的患者中可见大量"激活"的免疫细胞在角膜内皮细胞面聚集,内皮细胞几乎完全破坏;基质细胞明显水肿,部分被"激活"且伴有大量免疫细胞聚集.结论:①内皮排斥反应的早期能够发现角膜内皮面有免疫细胞沉积;②角膜内皮面的免疫细胞沉积与角膜内皮排斥反应的轻重成正相关;③角膜内皮排斥反应实际上是一个混合排斥反应的过程;④共焦显微镜对角膜内皮排斥反应具有实时、无创、敏感、准确以及可重复、可比较、可活体观察等临床价值.
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共聚焦显微镜对角膜移植术后内皮型免疫排斥反应观察
目的 应用激光共聚焦显微镜(Confocal LaserScaning Microscope,CLSM)观察角膜移植术后内皮型免疫排斥反应的特征及抗排斥治疗后的转归.方法 应用CLSM对16例角膜移植术后内皮型免疫排斥反应的病例,分别在抗排斥治疗前、治疗3～7d和1月后,对其病灶的特定位点进行检查,分析角膜上皮细胞、基质细胞、内皮细胞及免疫细胞的数量及形态学变化.结果 (1)16例患者中,8例可见典型的内皮排斥线,CLSM下:内皮排斥线是由体积较小反光明亮的炎症细胞和体积较大边界不清的异常内皮细胞构成.排斥线经过的区域上皮细胞体积增大,上皮基底层大量树突状Langerhans细胞,基质层水肿增厚,呈网格状改变.内皮细胞体积增大,边界模糊,六边形结构消失,可见多核细胞.基质水肿较重的病例,内皮层面见大量强反光团,内皮细胞无法成像.排斥线以上角膜植片相对透明的部分则各层细胞排列基本规则,内皮面少量免疫细胞附着.另8例表现为植片弥漫水肿混浊,CLSM下表现与内皮排斥线经过区域类同.(2)药物治疗3～7d后,12例患者明显好转.CLSM下见上皮基底层下树突状Langerhans细胞明显减少;基质细胞核清晰可见;内皮细胞恢复六边形结构,密度增加,其表面免疫细胞数量减少.4例患者基质层水肿减轻,中深基质层细胞有变性纤维化现象,内皮细胞层强反光团明显减少,但内皮细胞仍不能清晰成像.此4例患者用药1月后基底膜下仍有局限性树突Langerhans细胞聚集,中深基质层变性纤维化,内皮细胞排列不规则,有变圆或拉长现象.结论 应用CLSM可在细胞学水平对角膜移植术后内皮型免疫排斥反应的过程与转归进行活体的动态观察,对指导抗排斥治疗,有效提高角膜移植排斥反应的诊治水平,具有重要的临床意义.
