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  • 5-氮杂胞苷诱导脐带间充质干细胞向成肌细胞分化研究

    作者:蓝建发;罗新;宋泓;石海燕;郭红宇

    目的 探讨人脐带间充质千细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HuMSCs)向成肌细胞分化.方法 贴壁法分离HuMSCs;流式细胞仪分析其表面抗原;透射电镜及原子力电镜观察细胞超微结构;5-氮杂胞苷诱导细胞向成肌细胞分化;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测成肌细胞特异基因结蛋白(desmin)和重链肌球蛋白(myosin heavy chain,MHC)表达;蛋白质印迹法(Western Blot)检测特异蛋白desmin和MHC表达.结果 贴壁法稳定从脐带分离出细胞;HuMSCs不表达CD31、CD34、CD45,强表达CD29、CD90、CD44、CD105,极低表达HLA-DR、CD40;5-氮杂胞苷诱导后干细胞表达成肌细胞特异基因及蛋白明显高于对照组.结论 贴壁法分离HuMSCs可靠、纯度高;5-氮杂胞苷可诱导HuMSCs向成肌细胞分化.

  • 人脐带间充质干细胞移植治疗大鼠压力性尿失禁

    作者:蓝建发;潘华;罗新;石海燕

    目的 探讨人脐带间充质干细胞(HUMSCs)移植治疗大鼠压力性尿失禁(SUI)的作用机制及有效性和可行性.方法 建立SUI大鼠模型,模型大鼠分为HUMSCs治疗组8只(A组,大鼠尿道周围注射HUMSCs约1×107个细胞)和实验对照组8只(B组,相同部位注射等量生理盐水),另取6只正常大鼠作为正常对照组(C组).建模后4周,将HUMSCs移植注射于大鼠尿道周围,在移植注射前1周及移植注射后6周分别测量所有大鼠大膀胱容量(MBC)和漏尿点压力(LPP);行免疫组织化学检查,分析大鼠尿道括约肌中结蛋白、重链肌球蛋白(MHC)和蛋白基因产物9.5 (PGP9.5)的表达.结果 HUMSCs治疗组大鼠MBC、LPP测量值均较移植治疗前明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);与实验对照组的MBC、LPP测量值相比显著增加,差异有统计学意义(P<0.01).免疫组织化学检查显示HUMSCs治疗组大鼠尿道括约肌中结蛋白、MHC、PGP9.5含量均较实验对照组明显增多,差异有统计学意义(P<0.01).结论 HUMSCs移植治疗SUI大鼠有效、可行,HUMSCs通过修复损伤的大鼠尿道括约肌和周围神经来提高控尿功能.

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