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肿瘤坏死因子相关诱导配体与化疗药物联合诱导抗化疗卵巢癌细胞凋亡的研究
目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)相关诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)和(或)化疗药物联合使用对人卵巢癌细胞系耐药株A2780与SKOV3细胞凋亡的影响.方法2005-01日本国岐阜大学免疫病理3种化疗药物(顺铂、紫杉醇、阿霉素)和TRAIL分别加入培养的A2780与SKOV3细胞,通过hoechst 33342染色在荧光显微镜下确定细胞凋亡效应;蛋白印记杂交法分析bax,bcl-2,及caspase-3,8蛋白表达量的变化.应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定A2780与SKOV3细胞体外增殖活性.结果3种化疗药物与TRAIL对A2780和SK-OV3细胞的生长都表现抑制作用,3种化疗药物与TRAIL联合用药组A2780与SKOV3的生长抑制率明显高于单独用药组.结论3种化疗药物与TRAIL联合作用所产生的正效应对卵巢癌临床治疗有潜在的意义.
关键词: 卵巢肿瘤 化疗 肿瘤坏死因子相关诱导配体 细胞凋亡 -
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在家蚕中的表达与鉴定
目的 以家蚕为生物反应器表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL),并检测其生物学活性.方法 将人TRAIL(93~281aa)基因重组于质粒pBacPAK8构建重组转移载体pBacAK8-TRAIL.与经线性化修饰的家蚕棱型多角体病毒(BmBacPAK)DNA共转染家蚕培养细胞株BmN,获得了插入TRAIL基因的重组病毒,重组病毒感染家蚕细胞和家蚕幼虫,使其表达人TRAIL.结果 Southern杂交表明重组病毒基因组中含有人TRAIL基因片段,RNA斑点杂交表明人TRAIL基因得到了转录,重组病毒感染家蚕细胞株(BmN)、家蚕幼虫,在细胞培养上清、细胞抽提物、幼虫的体液样品中通过Westblot分析都能检测得到表达产物的特异性条带;采用L929细胞检测TRAIL的生物学活性.结论 提示人TRAIL基因分别在家蚕培养细胞和蚕幼虫中得到高效表达,此基因杆状病毒表达系统的建立为进一步研究TRAIL奠定了基础.
关键词: 家蚕杆状病毒表达载体系统 肿瘤坏死因子相关诱导配体 凋亡 -
肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)与肝细胞凋亡研究进展
肿瘤坏死因子相关的调亡诱导配体(TRAIL)是新近发现的TNF家族中另一种能诱导凋亡的分子.本文就TRAIL的特性、5种受体、致凋亡的机制及与肝细胞凋亡关系的新进展作了综述.
关键词: 肿瘤坏死因子相关诱导配体 凋亡 TRAIL受体 -
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体、死亡受体5及诱骗受体2在子宫内膜癌中的表达及其临床意义
目的:检测人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的诱骗受体2(DcR2)、死亡受体5(DR5)在子宫内膜癌的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测52例子宫内膜癌组织、20例不典型增生子宫内膜组织、23例正常子宫内膜组织中DR5、DcR2阳性表达水平.并对子宫内膜癌患者的手术病理分析、肿瘤分化程度、组织类型、肌层浸润等临床病理因素进行分析.结果:DcR2在正常子宫内膜组织中的表达高于子宫内膜癌组织(P<0.01);DR5在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜和子宫内膜癌组织中的表达呈递增趋势,两两比较差异均有统计学意义(P<0.01).结论:子宫内膜癌细胞由于高表达DR5和低表达DcR2而易被TRAIL诱导凋亡,这一结果为临床治疗子宫内膜癌提供可能实验依据.
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锌离子对sTRAIL分子聚合状态及肿瘤细胞杀伤活性的影响
可溶性肿瘤坏死因子相关诱导配体(sTRAIL)因对多种肿瘤细胞具有超强选择性杀伤活性而极可能成为新型抗肿瘤药物.基因工程重组表达sTRAIL过程中缺乏锌离子(Zn2+)可能是导致该蛋白对肿瘤细胞杀伤活性较低的重要原因.本文通过化学合成方法获得了sTRAIL编码基因,将其克隆到pQE30载体中获得了高表达.比较不同Zn2+浓度条件下制备的sTRAIL蛋白分子聚合状态和肿瘤细胞杀伤活性发现,无Zn2+的sTRAIL主要以单体形式存在,活性弱;有Zn2+的sTRAIL主要以同源三聚体形式存在,活性强.这表明Zn2+对维持sTRAIL肿瘤细胞杀伤活性极为重要,有必要在sTRAIL蛋白生产体系中添加适当浓度的Zn2+.
关键词: 肿瘤坏死因子相关诱导配体 肿瘤生物治疗 生物技术药物