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多重耐药铜绿假单胞菌群体感应系统与主动外排基因表达的研究
目的 研究临床多重耐药铜绿假单胞菌群体感应(QS)系统与主动外排泵MexAB-OprM系统基因表达水平与抗生素耐药关系.方法 收集苏州市立医院和上海市江湾医院2011年2月至6月间临床标本中分离的铜绿假单胞菌,定量分析细菌生物被膜形成能力；MIC法检测细菌抗生素耐药性,用多重聚合酶链反应(PCR)扩增群体感应系统lasI、lasR及主动外排泵系统mexA基因,实时定量逆转录RT-PCR检测lasI、lasR和mexA基因的相对表达量.结果 临床样本分离出84株铜绿假单胞菌,其中产生物被膜菌58株,占比69％；多重耐药菌共24株,占比28.6％；多重耐药菌株中产生物被膜有11株,占45.8％；多重耐药菌中mexA基因表达上调有18株,占75％；lasI基因表达上调有8株,占33.3％.结论 多重耐药菌株的生物被膜形成率显著低于非多重耐药组,多重耐药铜绿假单胞菌的主动外排泵MexAB-OprM系统基因表达出现显著上调,生物被膜菌的lasI基因表达显著上调而lasR基因的表达无明显变化.
关键词： 多重耐药铜绿假单胞菌 主动外排基因 抗生素耐药 生物被膜菌 -
肺气虚证大鼠气道病变和免疫复合物相关性的研究
目的:探讨肺气虚证大鼠IC和气道病变发生发展的相关性.方法:将铜绿假单胞菌以滴鼻法感染大鼠辅以寒冷疲劳刺激,诱导肺气虚证的发生,观察气道病理改变.直接法免疫组化染色检测肺支气管小血管壁的IC,PEG 沉淀法检测CIC.并设一组补肺益气治疗组予以反证.结果:模型组大鼠支气管慢性炎症明显并伴有急性炎症,组织IC和血清中CIC与正常对照组比较平均光密度及浊度均值显著升高,P＜0.01.补肺益气治疗组支气管慢性炎症不明显,组织IC和血清中CIC接近正常对照组P＞0.05.结论:用呼吸道生物被膜菌铜绿假单胞菌复制的肺气虚大鼠,在呼吸道慢性感染中可以刺激机体产生IC,气道的炎性改变和免疫复合物的形成相关.补肺益气治疗可以消除组织IC、血清CIC,促进支气管慢性炎症消退.
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呼吸道生物被膜菌致肺气虚证大鼠模型的研制
目的:研制大鼠肺气虚证模型,为研究因慢性呼吸道感染导致肺气虚证的诊治提供可靠的实验动物.方法:健康SD大鼠随机分为空白对照组、烟熏对照组,以及高、中、低菌量模型组.模型组采用呼吸 道生物被膜菌(bacterial biofilm,BF)铜绿假单胞菌滴鼻法,辅以寒冷疲劳刺激引起大鼠呼吸道慢性感染,诱导肺气虚证的发生.观察各组证候表现、游泳时间、体重变化、血液流变学指标的改变,以及肺支气管组织器官病理改变.结果:高、中、低菌量模型组大鼠的一般体征均符合肺气虚证,症状较烟熏组稳定.游泳时间和体重增加低于空白对照组,尤以高菌量组为明显(P＜0.05,P＜0.01).血流变指标提示血液流变性有障碍,肺及支气管炎症明显,炎症的程度和感染菌量有关.结论:将呼吸道生物被膜菌(铜绿假单胞菌)以滴鼻法并辅以寒冷疲劳刺激,可以诱导大鼠肺气虚证模型,相关的指标表明证候表现与中医学理论的病机相符,且该模型具有稳固、易复制、贴近原型的特点.
