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人牙骨移植材料修复兔胫骨缺损形成新骨的抗压强度
背景:国外已有将自体牙骨移植材料用于修复牙种植区骨量不足,但形成新骨的强度和质量的研究国内外报道较少.目的:探讨人牙骨移植材料植入兔胫骨缺损形成的新骨的抗压强度.方法:①取患者遗弃的完整正畸拔除牙、松动磨牙、双尖牙制备人牙骨移植材料;②利用环形骨锯制作 2 个直径5 mm的胫骨洞穿性骨缺损兔模型,分别设为牙骨移植材料组和牛骨移植材料组,植入人牙骨移植材料和市售牛骨移植材料,以未损伤部位作为对照组.结果与结论:牙骨移植材料组修复兔胫骨缺损形成新骨的显微结构明显比牛骨移植材料组完整,且新骨的大抗压强度和刚度均大于牛骨移植材料组.说明牙骨移植材料修复兔胫骨缺损形成新骨的效果优于牛骨移植材料.
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人牙骨移植材料对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7增殖分化的影响
目的 探讨人牙骨移植材料对巨噬细胞增殖分化以及形态的影响,了解人牙骨移植材料的生物相容性和细胞毒性.方法 收集新鲜人离体牙,制备人牙骨移植材料,共聚焦显微镜下观察小鼠单核巨噬细胞RAW264.7与人牙骨移植材料共培养后对材料黏附情况.扫描电镜观察人牙骨移植材料、OSTEONⅡ人工骨植入物及未处理牙粉的形貌.配制不同成分浸提液,分4组:A组(含10％FBS的DMEM培养液)、B组(人牙骨移植材料)、C组(OSTEONⅡ人工骨植入物)、D组(未处理牙粉).分别将4组浸提液与细胞共培养,倒置显微镜观察细胞形态变化定性判定细胞毒性,结合MTT法检测细胞增殖分化结果及细胞相对增殖率定量判定细胞毒性;通过锥虫蓝染色检测各组细胞活力;ELISA法检测炎性因子TNF-α和IL-6表达.结果 扫描电镜观察示,人牙骨移植材料和OSTEONⅡ人工骨植入物的表面都具有均匀的孔状结构,而未经处理牙粉胶原纤维结构及脱矿牙本质层全层塌陷,无特定结构.共聚焦显微镜观察示,细胞在人牙骨移植材料上生长良好.细胞与浸提液共培养后,观察示A、B、C组细胞形态和数量正常,毒性反应分级均为0级,而D组均为3级.MTT检测示,B、C组各时间点细胞毒性均为0级或1级,提示材料合格;D组培养1d时细胞毒性为2级,3、5、7d均为4级,结合细胞形态分析,提示材料不合格.锥虫蓝染色示,各时间点A、B、C组细胞数量均显著高于D组,差异有统计学意义(P＜0.05),A、B、C组间差异无统计学意义(P＞0.05).ELISA检测示,各时间点A、B、C组TNF-α和IL-6含量均显著低于D组,差异有统计学意义(P＜0.05);A、B、C组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 人牙骨移植材料与小鼠单核巨噬细胞共培养无细胞毒性,其浸提液对细胞增殖分化无明显影响,并不增加炎性因子表达,具有良好的生物相容性,有望用于临床骨缺损修复.
