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机械剪切法文献资料
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机械剪切对脾、肝、肾细胞DNA损伤程度的比较
目的探讨机械剪切对小鼠脾、肝、肾3种细胞DNA的损伤程度是否存在差异以及机械剪切法是否适于3种器官单细胞的分离.方法以未经任何处理的小鼠为实验组,以150mg/kg环磷酰胺处理的小鼠为对照组,用机械剪切法分离3种器官的单个细胞并制备单细胞悬液,然后用苔盼蓝排斥法检测细胞存活率,用单细胞凝胶电泳技术检测细胞DNA损伤程度.结果机械剪切法能快速分离出彗星实验所需的足量的脾、肝、肾3种器官的单个细胞;试验组脾、肝、肾细胞的拖尾率分别为3.20%、6.21%和9.22%,DNA迁移距离分别为27.30μm、28.45μm和47.10μm,且不同类细胞之间的拖尾细胞率以及脾细胞与肾细胞、肝细胞与肾细胞之间的DNA迁移距离均有显著差异(P＜0.05).试验组脾、肝、肾细胞的拖尾率和DNA迁移距离与阳性对照组的同类细胞比较都显著要低(P＜0.01,P＜0.001).结论机械剪切对小鼠脾、肝、肾3种细胞DNA的损伤依次加重.机械剪切法对脾、肝细胞的分离尤为适合.
