首页 > 文献资料
-
低剂量内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ对人U251胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响
目的 研究低剂量内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ(EMAP Ⅱ)对U251胶质瘤细胞迁移和侵袭行为的影响及相关分子机制.方法 EMAP Ⅱ (0.05nM)分别处理U251细胞不同时间后,采用Transwell小室实验及MatrigelTranswell小室实验检测U251细胞迁移和侵袭的变化,应用Western blot方法检测FoxO1和p-FoxO1的表达变化;转染FoxO1的沉默质粒(shFoxO1)到U251细胞中,检测FoxO1敲减后EMAP Ⅱ作用下U251细胞迁移和侵袭行为的改变.结果 EMAPⅡ作用0.5h和1h时显著抑制U251细胞的迁移和侵袭行为;与EMAPⅡ作用0h组相比,FoxO1的表达在EMAPⅡ作用0.5h和1h时显著升高,而p-FoxO1的表达显著下降;此外,shFoxO1可减弱EMAPⅡ对U251细胞迁移和侵袭行为的抑制作用.结论 EMAP Ⅱ抑制U251细胞的迁移和侵袭,其机制可能与FoxO1的表达上调有关.
关键词： 内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ 胶质瘤细胞 迁移和侵袭 FoxO1 -
蛋白激酶C在内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性中的作用
目的 探索信号分子蛋白激酶C( protein kinase C,PKC)在内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ( endothelial monocyte activating polypeptide-Ⅱ,EMAP-Ⅱ)增强血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)通透性中的作用.方法 荷瘤大鼠被随机分成3组C每组8只):对照组、EMAP-Ⅱ组、H7+EMAP-Ⅱ组.采用伊文思蓝( Evans blue,EB)渗透性实验评估实验各组BTB通透性的变化；Western Blot法、免疫组织化学法及免疫荧光法检测脑微血管内皮细胞上紧密连接相关蛋白occludin表达水平的变化.结果 与对照组和H7+EMAP-Ⅱ组相比较,EMAP-Ⅱ组BTB通透性显著增高,紧密连接相关蛋白occludin的表达水平显著降低,EMAP-Ⅱ的作用受到PKC抑制剂H7预处理的显著抑制.结论 信号分子PKC在EMAP-Ⅱ增强BTB通透性中发挥着重要的作用.
关键词： 内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ 血肿瘤屏障 通透性 蛋白激酶C -
信号分子PKC调控内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ增强血肿瘤屏障通透性机制的研究
目的 探索信号分子蛋白激酶C (PKC)参与内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ(EMAP-Ⅱ)增强血肿瘤屏障(BTB)通透性过程的相关机制.方法 采集出生3～5 d的Wistar胎鼠大脑皮质,应用酶消化法及葡聚糖离心法获得脑微血管段后,接种于培养皿中进行脑微血管内皮细胞(BMEC)原代培养;将BMEC与C6脑胶质瘤细胞共培养,构建体外BTB模型;共培养后的BMEC随机分成3组:对照组、EMAP-Ⅱ组和H7+ EMAP-Ⅱ组,测定跨内皮阻抗值和辣根过氧化物酶流量,评估各组BTB通透性的变化,Western blot法和免疫荧光法检测紧密连接相关蛋白claudin-5在各组BMEC上的表达水平变化;共培养后的BMEC被随机分成5组:EMAP-Ⅱ0,0.5,1,2,4h组,Western blot法检测EMAP-Ⅱ作用不同时间点时BMEC膜上PKC各亚型的蛋白表达变化.结果 与对照组比较,EMAP-Ⅱ组BTB的通透性显著增高(P=0.002),BMEC上claudin-5的表达水平显著降低(P=0.005),EMAP-Ⅱ的上述作用受到PKC抑制剂H7预处理的显著抑制(P=0.036);EMAP-Ⅱ作用0.5 h时,BMEC膜上PKC-α和PKC-β的蛋白表达水平显著增加,1h时达到峰值,其后表达水平逐渐下降,4h时恢复至未用药水平.BMEC膜上PKC-ξ的蛋白表达水平于0.5 h时显著增加,其后表达水平逐渐下降,2h时恢复至未用药水平.结论 信号分子PKC参与EMAP-Ⅱ增强BTB通透性的过程,其机制可能与BMEC膜上PKC-α、-β和-ξ的表达水平上调有关.
关键词： 内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ 血肿瘤屏障 通透性 蛋白激酶C -
局部亚低温干预对大鼠脑缺血再灌注后内皮-单核细胞激活多肽表达的影响
目的 通过观察局部亚低温干预对大鼠脑缺血再灌注后缺血半暗带区内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ(EMAPⅡ)、EMAPⅡ前蛋白(proEMAPⅡ)表达的影响,从而探讨局部亚低温干预的脑保护机制.方法 共选取雄性Wistar大鼠44只,采用随机数字表法将其分为假手术组、常温组及亚低温组.采用改良Longa线栓法将常温组及亚低温组大鼠制成大脑中动脉缺血再灌注模型,亚低温组于再灌注后立即给予亚低温干预(持续治疗6h).于脑缺血再灌注后6h、12h、24 h、48 h及72 h时处死大鼠并取脑,采用HE染色观察各组大鼠神经细胞受损情况,采用免疫组化染色法比较各组大鼠缺血脑组织EMAPⅡ、proEMAPⅡ阳性细胞表达情况.结果 常温组及亚低温组EMAPⅡ阳性细胞均于缺血再灌注6h时明显表达,于再灌注24 h时达到峰值,随后逐渐下降；2组大鼠proEMAPⅡ阳性细胞均于缺血再灌注6h时明显表达,之后亚低温组逐渐下降,常温组于再灌注12h达到峰值后开始下降,至再灌注72 h时2组大鼠proEMAPⅡ阳性表达均已接近假手术组水平.亚低温组EMAPⅡ阳性表达在脑缺血再灌注6h、12h、24 h、48 h及72 h时均较常温组显著减少(P＜0.05).常温组proEMAPⅡ阳性细胞数量在脑缺血再灌注6h、12h及24 h时均较亚低温组明显增多.结论 局部亚低温干预能减弱大鼠缺血半暗带区EMAPⅡ、proEMAPⅡ阳性表达,抑制缺血再灌注损伤导致的细胞凋亡及炎性反应,从而发挥神经保护作用.
关键词： 脑缺血再灌注 亚低温 内皮-单核细胞激活多肽Ⅱ 大鼠
