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华蟾素注射液对小鼠肝癌组织Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达的影响
目的:观察华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Caspase-8、Caspase-3基因(mRNA)及蛋白表达的影响.方法:40只ICR小鼠采用皮下接种H22肝癌细胞株的方法复制小鼠肝癌模型,造模成功后,将小鼠随机分为4组:模型组,华蟾素注射液低、高剂量组,顺铂(DDP)组.观察各组小鼠肿瘤生长情况变化.采用荧光定量RT-PCR方法和Western Blot检测方法检测各组H22肝癌小鼠肿瘤组织中Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达的影响.结果:华蟾素低剂量组不能有效抑制肿瘤的生长,而华蟾素高剂量组、DDP组的抑瘤率分别为41.67％、52.78％,具有明显的抑制肿瘤生长作用(P＜0.01).与模型组比较,华蟾素低剂量组小鼠肝癌组织中的Caspase-8、Caspase-3表达无明显差异,而华蟾素高剂量组、DDP组能促进肝癌组织中的Caspase-8、Caspase -3的mRNA的表达升高(P＜0.05)及蛋白表达明显升高(P＜0.01).结论:华蟾素注射液具有抑制肝癌细胞生长的作用,其分子机制可能是上调肿瘤组织Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白的表达,从而促进肝癌肿瘤细胞发生凋亡,达到抗肿瘤作用.
关键词： 华蟾素 半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶 凋亡 肝癌 -
红藻氨酸致痫大鼠海马神经元中真核生物起始因子2α酶切片段的产生
目的:研究半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)在红藻氨酸癫痫模型大鼠海马凋亡神经元中,对其已知底物真核生物起始因子2(eIF2α)的作用. 方法:制备红藻氨酸诱导大鼠癫痫模型,记录模型发作行为及脑电图表现,以TUNEL法检测模型癫痫发作终止后12、24、48、72和96 h海马神经元凋亡情况,同时以Western blot法检测模型鼠海马eIF2α的表达变化及其与细胞凋亡之间的相关性. 结果:在癫痫发作后12 h出现凋亡神经元,随时间延长,海马神经元凋亡数不断增加,72 h达高峰;发作后24 h海马神经元出现了Caspase-3酶切eIF2α产生的片段,并逐渐变浓,至72 h. 结论:癫痫模型大鼠海马中Caspase-3酶切eIF2α与神经元凋亡的发生时间一致,提示在癫痫模型大鼠海马神经元凋亡中eIF2α被Caspase-3酶切.
关键词： 癫痫 海马 凋亡 真核生物起始因子2 半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶 -
姜黄素对肝癌HepG2细胞和肝脏正常细胞L-02细胞的生长抑制作用及其机制
目的 观察姜黄素对肝癌HepG2细胞和肝脏正常L-02细胞的生长抑制作用,探讨其抗肿瘤的作用和机制.方法 贴壁法培养HepG2细胞和L-02细胞,噻唑蓝(MTT)比色法分析姜黄素对细胞生长的抑制率,流式细胞仪(FACS)检测细胞周期及凋亡,免疫细胞化学及Western blot技术检测半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8、Caspase-9、死亡受体5(DR5)、B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)和bax蛋白的表达.结果 姜黄素在100 mg/L浓度下,对HepG2细胞生长抑制率可达84％,凋亡率为25.89％,而诱导正常L-02细胞的凋亡率为10.10％,阻滞HepG2细胞周期于G1期,此过程中Caspase-3、Caspase-9和Caspase-8被激活,DR5蛋白表达上升,bcl-2/bax蛋白表达比率下降.结论 姜黄素能够选择性杀伤HepG2细胞,并通过内源性和外源性两条通路促其凋亡.
关键词： 姜黄素 HepG2细胞 凋亡 半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶 -
植物甾醇诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡机制初探
目的 初步探讨植物甾醇诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的可能作用机制.方法 用不同浓度(0,0.5,2.0,8.0 μmol/L)的植物甾醇与SH-SY5Y细胞共同培养,流式细胞术测定细胞周期,Western-blot检测凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-3的前体及活化体(Pro-Caspase-9、Cleaved-Caspase-9、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3)的表达.结果 不同浓度的植物甾醇可引起SH-SY5Y细胞不同程度的凋亡,并将细胞周期阻滞在G0/G1期,同时引起Caspase相关蛋白的活化.当植物甾醇浓度为2.0μmol/L时,与空白对照组相比,G0/G1期细胞所占百分比从84.35％上升到88.14％,有显著统计学差异(F=25.790,P＜0.001);Caspase-3,9有活性剪切体明显增多,与空白对照组相比具有统计学差异(F=30.341,P＜0.001,F=18.184,P=0.001).结论 植物甾醇可引起SH-SY5Y细胞的凋亡,其机制可能与Caspase-9、Caspase-3的激活有关.
关键词： 植物甾醇 人神经母瘤细胞 细胞凋亡 半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶 -
Bcl-2、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶在SD大鼠脑梗死急性期的动态表达研究
目的 探讨SD大鼠大脑中动脉闭塞模型急性期半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)和抗凋亡蛋白Bcl-2(B cell lymphoma/leukemia 2)不同时相的动态表达.方法 健康雄性SD大鼠36只,采用完全随机设计方法分为空白对照组(n=4)、假手术组(n=16)和手术组(n=16)并予以处理.用ELISA法测定各组大鼠不同时点Bcl-2和Caspase-3的OD值,绘制标准曲线并计算对应的浓度.结果 ①Bcl-2的表达:手术组术后6h显著升高,12h点达高峰,3d时下降接近空白对照组水平.手术组与假手术组在6、12、24h时间点比较差异有统计学意义(P＜0.05);手术组与空白对照组在2、3、6、12、24h及3、7d时间点比较差异有统计学意义(P＜0.05);手术组内6、12、24h与其他时间点比较差异有统计学意义(P＜0.05).②Caspase-3的表达:手术组Caspase-3在术后0.5h即开始表达,并逐渐升高,24h达到高峰,以后逐渐下降,在3、7d仍高于假手术组和空白对照组(P＜0.05).手术组内6h、12h、24h、3d表达水平与其他各时间点比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Bcl-2和Caspase-3在脑梗死急性期均显著升高,参与神经元缺血缺氧的病理过程,在神经细胞早期的凋亡和存活中有着重要作用.二者的表达水平有正相关性(ρ=0.744592,P＜0.05).
关键词： 脑梗死 Bcl-2 半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶
