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赭曲霉毒素A的酶联免疫检测——Ⅰ.抗原的制备
采用活性酯法制备赭曲霉毒素A(OTA)的全抗原,并以正交试验L9(34)来选择活性酯法的佳条件.通过对实验结果的统计分析得出,当OTA与牛血清白蛋白(BSA)的摩尔比为20∶1,OTA∶N-羟基琥珀酰胺∶N',N-二环乙基碳化亚胺的摩尔比为1∶2∶4,OTA的活化时间为60min,偶联时间在90min的情况下,OTA与BSA的连接比可达9.64,OTA的利用率可达48.2%.
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新型肝靶向载体[(2-乳糖酰胺基)乙胺基]甲酸胆固醇酯的合成与鉴定
目的 将肝靶向基团半乳糖基引入到胆固醇结构中,制备[(2-乳糖酰胺基)乙胺基]甲酸胆固醇酯(CH-ED-LA).方法 以乳糖酸、乙二胺和胆固醇氯甲酯为原料,设计了内酯法和活性酯法2条合成路线,通过一系列酯化反应和酰化反应合成CH-ED-LA,采用IR、MS和NMR对其进行表征.结果 采用工艺简单、收率较高的内酯法合成CH-ED-LA.结论 CH-ED-LA是乙二胺与乳糖酸和胆固醇氯甲酯通过酰胺键连接的半乳糖化胆固醇衍生物.
关键词： [(2-乳糖酰胺基)乙胺基]甲酸胆固醇酯 内酯法 活性酯法 肝靶向 化学合成 -
培哚普利合成方法的研究进展
目的:为培哚普利的合成提供参考.方法:查阅国内外相关文献,对培哚普利的合成方法进行综述.结果与结论:培哚普利的合成方法主要可以归纳为非对映异构体法、内酸酐法、活性酯法、酰氯法等.其中非对映异构体法合成产物为混合物,目前无合适的拆分试剂；内酸酐法中所用试剂光气有剧毒；活性酯法和酰氯法较适合工业生产.活性酯法和酰氯法合成过程中均有两个关键中间体N-[(S)-1-乙氧羰基丁基]-(S)-丙氨酸(中间体1)和(2S,3aS,7aS)-2-羧基全氢吲哚(中间体2),中间体1可通过L-正-缬氨酸乙酯与丙酮酸缩合还原后得到；中间体2可以L-苯丙氨酸为手性源,定向合成(S)-二氢吲哚-2-羧酸,再经还原后得到.
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甘草酸单克隆抗体的制备与ELISA方法的建立
目的 制备特异性的甘草酸单克隆抗体.方法 通过活性酯法分别制备了甘草酸免疫抗原GA-KLH和包被抗原GA-OVA;用免疫抗原免疫Balb/c小鼠,采用间接竞争ELISA法筛选后,成功获得了能稳定分泌甘草酸单克隆抗体的杂交细胞株3D6;用阳性细胞株刺激小鼠,获得了高效价的、特异性很高的甘草酸单克隆抗体.结果 经检测与甘草酸主要结构类似物甘草次酸的交叉反应率低于0.5％,与熊果酸、齐墩果酸等甘草酸结构类似物无交叉反应;将该方法应用于甘草样品实测,采用HPCL法验证,结果表明:所采用的ELISA分析方法测定的数据与HPLC分析方法有很好的相关性(r2=0.9977).结论 为甘草酸ELISA快速检测试剂盒的开发奠定了良好的基础.
