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槲皮素抑制HSP70表达对紫外线C致DNA损伤的影响
目的 研究热休克蛋白70(HSP70)在紫外线C致DNA损伤中的保护作用.方法 用254 nm紫外线不同照射剂量(10,20,40,80 J/m2)照射槲皮素(quercetin)抑制HSP70表达的A549细胞株(A549/quercetin),用Western-blot检测HSP70的水平,用碱性单细胞凝胶电泳检测DNA损伤,用彗星细胞率和Olive尾矩评价DNA损伤情况.A549细胞作为正常对照组,DMSO处理作为溶剂对照组(A549/DMSO).结果 无论在A549组、A549/DMSO组,还是在A549/quercetin组,DNA损伤的彗星细胞率随着紫外照射的剂量增加而逐渐增加,在10 J/m2时,未观察到HSP70的保护作用,3组的彗星细胞率差异无统计学意义;在20 J/m2照射时,可以观察到HSP70的保护作用,但不明显;40 J/m2照射时,观察到HSP70对DNA有很明显的保护作用;80 J/m2照射时,HSP70的保护作用又逐渐地消失了.进一步分析40 J/m2照射的Olive尾矩显示,与A549组或A549/DMSO组相比,A549/quercetin组Olive尾矩明显增加,差异有统计学意义(P<0.01).结论 HSP70能保护细胞免受一定剂量范围内的紫外线C照射引起的DNA损伤.
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HSP70过表达对紫外线C致DNA损伤的影响
[目的]研究HSP70过表达对紫外线致DNA损伤的影响.[方法]设A549、A549/pcDNA、A549/HSP70 3个组,分别用不同紫外线照射剂量(0、10、20、40、80 J/m2)照射HSP70表达正常和过表达的A549细胞株,用Western-blot检测HSP70的水平,用碱性单细胞凝胶电泳检测DNA损伤情况.[结果]DNA损伤的彗星率随紫外线照射的剂量增加而逐渐加重.当在相同剂量40J/m2时,A549/HSP70组的彗星率为24 %、尾矩为14.31±1.60,A549相应为40 %、18.83±0.41,A549/pcDNA为40%、18.67±0.81.在40 J/m2照射所致的Olive尾矩明显减少,与对照组比较差异有显著性(P<0.01).[结论]HSP70能保护细胞免受一定剂量范围内的紫外线引起的DNA损伤.
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紫外线C对A549细胞HSPs表达的影响
[目的]研究紫外线C(UVC)对热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)27、70及90的影响. [方法]用紫外线不同照射剂量(0、10、20、40、80 J/m2)来照射A549细胞株,用Western-blot检测HSP27、HSP70、HSP90的表达水平. [结果]随着UVC剂量的升高,HSP70和HSP27的表达水平先升高,达到一个高峰后又降低.HSP27表达在20 J/m2时达到高峰,HSP70表达在40J/m2时达到高峰,HSP90各剂量的UVC照射下,未见显著性变化.与对照组(0J/m2)相比,在10J/m2时,HSP27和HSP70表达增加(P<0.05);在20 J/m2时,HSP27表达显著增加(P<0.01),HSP70表达也继续增加(P<0.05);在40J,m2时,HSP27表达开始下降,但与对照组相比差异没有显著性(P>0.05),HSP70表达仍显著增加,与对照组相比差异有显著性(P<0.01)在80 J/m2时,HSP27表达与对照组和40 J/m2组相比,差异无显著性(P>0.05),HSP70表达下降,但仍高于对照组(P<0.05).在10、20、40和80J/m2的UVC照射下,HSP90表达变化均未见显著性差异(P>0.05). [结论]随着UVC剂量的升高,HSP70和HSP27的表达水平先升高,达到一个高峰后又降低.HSP27,HSP70能被一定剂量范围的UVC照射所诱导,高剂量UVC照射时HSP27、HSP70的表达被抑制,但HSP90表达未发现能被诱导.